Omnimabs 胰蛋白酶EDTA (0.25%),含酚红
- 价格: ¥190/瓶
- 发布日期: 2025-06-20
- 更新日期: 2025-06-20
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Omnimabs 胰蛋白酶EDTA (0.25%),含酚红
这种胰蛋白酶的液体制剂含有EDTA和酚红。胰蛋白酶-EDTA是由胰蛋白酶粉末制成的,胰蛋白酶粉末是从猪胰腺中提取的蛋白酶的辐照混合物。由于其消化强度,胰蛋白酶被广泛用于细胞解离、常规细胞培养传代和初级组织解离。解离所需的胰蛋白酶浓度随细胞类型和实验要求而变化。
产品组成
胰蛋白酶(Trypsin):浓度为 0.25%,是一种丝氨酸蛋白酶,能够水解细胞间的蛋白质,破坏细胞间的连接,使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。
EDTA:浓度为 0.02%(约 0.53 mM),是一种螯合剂,能够螯合钙离子和镁离子,增强胰蛋白酶的消化效果。
酚红(Phenol Red):浓度为 10 mg/L,作为 pH 指示剂,溶液偏碱性时呈紫红色,偏酸性时呈橘红色。
溶剂:通常为 Hanks' Balanced Salt Solution(HBSS)或 PBS 缓冲液,不含钙镁离子。
作用机制
胰蛋白酶:通过水解细胞间连接蛋白(如细胞外基质蛋白),使细胞间的连接松散,从而实现细胞的分离。
EDTA:螯合细胞外基质中的钙离子和镁离子,破坏细胞间的黏附作用,增强胰蛋白酶的消化效果。
酚红:用于监测细胞培养液的 pH 变化,帮助判断培养环境是否适宜。
使用方法
消化时间:根据细胞类型和实验需求确定消化时间,通常室温下 2-5 分钟即可。
操作步骤:
使用前将胰蛋白酶-EDTA 溶液从 -20°C 取出,置于 2-8°C 解冻。
解冻后轻轻摇匀,确保溶液均匀。
将解冻后的溶液加入贴壁细胞培养皿中,覆盖细胞表面。
在显微镜下观察细胞,待细胞完全脱落成单个细胞后,立即终止消化。
用新鲜培养基终止消化,轻轻吹打细胞,制成单细胞悬液。
注意事项
无菌操作:使用时需严格遵循无菌操作规程,避免污染。
避免反复冻融:建议分装后于 -20°C 冷冻保存,避免反复冻融导致活性下降。
消化时间控制:消化时间需根据细胞类型调整,避免过长时间消化导致细胞损伤。
pH 指示:酚红颜色变化可提示溶液 pH 变化,若颜色异常,可使用 2M 氢氧化钠溶液微调。
保存与运输
保存条件:建议在 -20°C 冷冻保存,有效期为 2 年。
运输条件:通常采用干冰运输