猪（Porcine）回肠yan抗体（Ileitis-Ab）ELISA检测试剂盒

产品货号：DM-P7362

产品规格：48/96T

• 预期用途：猪回肠yan是由细胞内劳森菌（Lawsonia intracellularis）引起的一种常见肠daoji病。该试剂盒用于检测猪血清中的胞内劳森菌抗体，可帮助判断猪是否感染过回肠yan，也可用于猪场回肠yan疫苗的免疫监测及该病的辅助诊断。
• 检测原理：常见的有间接 ELISA 法和竞争 ELISA 法。间接法是酶标板上包被重组胞内劳森菌蛋白抗原，样品中的抗体与板上抗原特异性结合形成抗原抗体复合物，再与后续加入的酶标二抗结合，酶标二抗上的酶催化底物显色，显色深度与样品中的抗体含量成正相关。竞争法是酶标板上包被有重组抗原，猪血清中的特异性抗体与板上包被抗原结合，会阻断后续加入的酶标单抗与板上抗原的结合位点，再加入底物显色，显色程度与血清中的抗体含量呈反比关系。
• 试剂盒组成：一般包括抗原包被板、阳性对照、阴性对照、酶标二抗、样品稀释液、20X 洗板液、TMB 底物、终止液等。
• 样本处理：通常取猪血清作为样本，在血清稀释板上使用红色稀释液将样品血清稀释 40 倍，例如将 5μL 的血清加入到 195μL 的红色稀释液中混匀，备用。
• 保存条件：一般试剂盒各组分在 2-8℃保存，若试剂盒超过一个月不使用，建议阴阳性对照和酶标二抗在 - 20℃储存。
• 适用仪器：含 450nm 波长的酶标仪，用于读取吸光值。
• 操作流程：实验前 1 小时将试剂盒从冰箱中取出回复室温；然后在抗原包被板相应孔中加入阳性对照、阴性对照和预稀释的血清样品，轻微振荡 1 分钟，封板后在 20-25℃下孵育 30 分钟；弃去板中液体，用洗涤液洗板 5 次并拍干；加入酶标二抗，封板后在 20-25℃下孵育 30 分钟，再次洗板；加入 TMB 底物，室温下暗处孵育 15 分钟； 加入终止液，用酶标仪在 450nm 波长读数。
• 结果判断：通过公式计算样品 PP 值，即 PP 值 =[（样品 OD 值 - 阴性对照 OD 值）÷（阳性对照 OD 值 - 阴性对照 OD 值）]× 。若阴性对照的 OD 值平均值 < 0.3，阳性对照 OD 值平均值≥0.5，则实验有效。样品 PP 值小于 40% 为阴性，说明样品血清中抗体阴性；样品 PP 值大于 40% 为阳性，说明样品血清中抗体阳性。