猪STAT蛋白抑制因子3(PIAS3)酶联免疫试剂盒 

产品货号：DM-P7324

产品规格：48/96T

以下是猪 STAT 蛋白抑制因子 3（PIAS3）酶联免疫试剂盒的详细介绍：
检测原理
通常采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。将猪 PIAS3 的特异性抗体预先包被在微孔板上，制成固相抗体。加入待检测的样本（如血清、血浆、组织匀浆等）和标准品后，样本中的 PIAS3 抗原会与固相抗体结合。然后加入生物素标记的检测抗体，它会与已结合在固相抗体上的 PIAS3 抗原特异性结合，形成 “固相抗体 - 抗原 - 检测抗体” 的免疫复合物。接着加入链霉亲和素 - 辣根过氧化物酶（HRP）结合物，链霉亲和素会与生物素特异性结合，从而将 HRP 连接到免疫复合物上。 加入底物 TMB，在 HRP 酶的催化下，TMB 转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 PIAS3 含量呈正相关，通过酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），再与标准曲线对比，即可计算出样品中 PIAS3 的浓度。
试剂盒组成
预包被酶标板：已包被有猪 PIAS3 特异性抗体的微孔板，用于捕获样本中的 PIAS3 抗原。
标准品：一系列已知浓度的 PIAS3 蛋白，用于绘制标准曲线，以便对样本中的 PIAS3 进行定量分析。
检测抗体：通常是生物素标记的猪 PIAS3 特异性抗体，用于与结合在固相抗体上的 PIAS3 抗原结合。
酶结合物：一般为链霉亲和素 - 辣根过氧化物酶（HRP）结合物，用于与生物素标记的检测抗体结合，进而催化底物显色。
底物溶液：如 TMB 底物，在 HRP 的作用下发生显色反应。
终止液：通常为稀硫酸溶液，用于终止底物的显色反应，使颜色稳定以便于酶标仪检测。
洗涤液：用于洗涤微孔板，去除未结合的物质，减少非特异性吸附带来的干扰。
其他：可能还包括标准品稀释液、检测缓冲液等，以及配套的封板膜、说明书等。
样本要求
可检测的样本类型通常包括猪的血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等生物样本。但需要注意样本的采集、处理和保存方法，以确保样本中 PIAS3 的活性和稳定性。例如，血清和血浆样本应避免溶血和脂血，组织匀浆要保证匀浆充分且无细胞碎片残留，细胞培养上清要在合适的时间收集并避免污染。
检测范围
不同厂家生产的试剂盒检测范围可能有所不同，但一般会根据猪 PIAS3 在正常生理状态和常见病理状态下的表达水平来确定。常见的检测范围可能在 0.1 - 10 ng/mL 或更宽的浓度区间内，具体数值需参考试剂盒的说明书。
保存条件
通常需要将试剂盒保存在 2 - 8℃的冷藏环境中。避免冷冻，因为反复冻融会影响试剂盒中抗体和其他成分的活性。在有效期内使用，不同试剂盒的有效期可能有所差异，一般为 6 - 12 个月，具体以产品说明书为准。
操作步骤
准备工作：将试剂盒从冷藏环境中取出，在室温下平衡 30 - 60 分钟，使试剂温度与室温一致。同时，将所需的样本、标准品、试剂等准备好，并按照说明书的要求进行稀释和分装。
加样：将标准品和待检测样本分别加入到预包被酶标板的相应孔中，通常每个样本和标准品需要设置复孔，以提高检测的准确性。加样量一般为 50 - 100 μL，具体根据试剂盒说明书操作。
温育：加样完成后，将酶标板盖上封板膜，在规定的温度（如 37℃）下温育一定时间（通常为 30 - 60 分钟），使样本中的 PIAS3 抗原与固相抗体充分结合。
洗涤：温育结束后，弃去孔内液体，用洗涤液洗涤酶标板。洗涤次数一般为 3 - 5 次，每次洗涤后要尽量吸干孔内的液体，以去除未结合的物质，减少非特异性干扰。
加检测抗体：向每个孔中加入生物素标记的检测抗体，加样量和温育条件按照说明书执行。再次温育使检测抗体与结合在固相抗体上的 PIAS3 抗原结合。
洗涤：同步骤 4，再次洗涤酶标板，去除未结合的检测抗体。
加酶结合物：加入链霉亲和素 - HRP 结合物，温育一段时间，使酶结合物与生物素标记的检测抗体结合。
洗涤：重复洗涤步骤，以去除未结合的酶结合物。
显色：加入底物 TMB 溶液，避光温育（如 37℃，15 - 30 分钟），在 HRP 酶的催化下，TMB 发生显色反应，溶液由无色变为蓝色。
终止反应：加入终止液，如稀硫酸，使蓝色溶液变为黄色，并立即在酶标仪上于 450nm 波长处测定各孔的吸光度（OD 值）。
结果计算：根据标准品的浓度和对应的 OD 值绘制标准曲线，然后将样本的 OD 值代入标准曲线方程中，计算出样本中 PIAS3 的浓度。如果样本的 OD 值高于标准曲线的上限，需要将样本适当稀释后重新检测，并在计算浓度时乘以相应的稀释倍数。
试剂盒性能指标
灵敏度：指试剂盒能够检测到的 PIAS3 浓度，一般用 检测限（LOD）来表示。例如，某些试剂盒的灵敏度可能达到 0.05 - 0.1 ng/mL，即当样本中 PIAS3 的浓度低于此值时，试剂盒可能无法准确检测到。
特异性：试剂盒应具有良好的