猪可溶性转铁蛋白受体1(sTfR1)酶联免疫试剂盒
- 价格: ¥1860/盒
- 发布日期: 2025-08-04
- 更新日期: 2025-08-04
产品详请
产地 |
上海
|
保存条件 |
2-8°
|
品牌 |
DUMABIO
|
货号 |
DM-P7317
|
用途 |
科研实验
|
检测方法 |
双抗夹心法
|
保质期 |
6个月
|
适应物种 |
猪
|
检测限 |
电询
|
数量 |
999
|
包装规格 |
48/96T
|
标记物 |
电询
|
样本 |
电询
|
应用 |
科研实验
|
是否进口 |
否
|
猪可溶性转铁蛋白受体1(sTfR1)酶联免疫试剂盒
产品货号:DM-P7317
产品规格:48/96T
以下是猪可溶性转铁蛋白受体 1(sTfR1)酶联免疫试剂盒的详细介绍:
检测原理
通常采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒中的微孔板预先包被有针对猪 sTfR1 的特异性抗体。加入样品(如血清、血浆、组织匀浆等)和标准品后,样品中的 sTfR1 抗原会与包被抗体结合。接着加入生物素化的检测抗体,它会特异性地结合到已与包被抗体结合的 sTfR1 抗原上。随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合,形成 “包被抗体 - sTfR1 抗原 - 生物素化检测抗体 - HRP 标记亲和素” 的免疫复合物。加入底物 TMB 后,在 HRP 的催化下,TMB 转化为蓝色产物,加入终止液后变为黄色。颜色的深浅与样品中 sTfR1 的含量呈正相关,通过酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),再与标准曲线对比,即可计算出样品中 sTfR1 的浓度。
试剂盒组成
ELISA 酶标板:已预先包被抗猪 sTfR1 抗体,用于抗原 - 抗体反应,有 96 孔或 48 孔等不同规格。
标准品:已知浓度的猪 sTfR1 蛋白溶液,用于绘制标准曲线,一般包含多个不同浓度梯度。
浓缩生物素化抗体:使用时需按要求稀释,与 sTfR1 抗原特异性结合。
浓缩 HRP 酶结合物:通常为 HRP 标记的亲和素,与生物素化抗体结合形成免疫复合物,需稀释后使用。
抗体稀释液:用于稀释浓缩生物素化抗体和 HRP 酶结合物。
浓缩洗涤缓冲液:通常为 25× 或其他倍数的浓缩液,使用时需按说明书稀释,用于洗涤酶标板,去除未结合的物质。
底物溶液(TMB):在 HRP 的催化下发生显色反应。
反应终止液:一般为硫酸溶液,用于终止酶促反应,使颜色稳定。
封板膜:用于在温育过程中密封酶标板,防止水分蒸发和外界污染。
说明书:详细介绍试剂盒的使用方法、注意事项、性能指标等信息。
样本要求
可检测猪的血清、血浆、组织匀浆等样本。
样本采集后应尽快检测,若不能及时检测,血清和血浆样本一般可在 -20℃或 -80℃下保存,避免反复冻融;组织匀浆也需按照相应要求保存。
样本应避免溶血、脂血等情况,以免影响检测结果的准确性。
操作步骤
准备工作:从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温;按照说明书要求稀释洗涤缓冲液等试剂;准备好酶标仪、恒温箱、移液器等仪器设备。
加样:将标准品和样品加入到相应的酶标板孔中,同时设置空白对照孔。
温育:将酶标板放入恒温箱中,按照规定的时间和温度进行温育,使抗原与抗体充分结合。
洗涤:温育结束后,用洗涤缓冲液洗涤酶标板,通常洗涤 3 - 5 次,每次浸泡时间和甩干方式需严格按照说明书操作,以去除未结合的物质。
加生物素化抗体:加入稀释好的生物素化抗体工作液,再次温育。
洗涤:同前一次洗涤步骤,去除未结合的生物素化抗体。
加 HRP 酶结合物:加入稀释好的 HRP 酶结合物工作液,温育。
洗涤: 洗涤酶标板,去除未结合的 HRP 酶结合物。
显色:加入底物 A 和底物 B,混匀后在暗处反应一段时间,使酶促反应充分进行,产生颜色变化。
终止反应:加入终止液,终止酶促反应,此时颜色不再变化。
读数:用酶标仪在 450nm 波长下测定各孔的吸光度(OD 值),并根据标准曲线计算样品中猪 sTfR1 的浓度。
性能指标
灵敏度:能够检测到的猪 sTfR1 的 浓度,一般在 pg/mL 或 ng/mL 级别。
特异性:试剂盒中的抗体与猪 sTfR1 具有高度特异性结合能力,与其他类似蛋白或物质的交叉反应率极低。
精密度:包括批内精密度和批间精密度。批内精密度是指在同一批次试剂盒中,对低、中、高不同浓度的样品进行多次检测,其变异系数(CV)应小于 10%;批间精密度是指在不同批次试剂盒中,对相同样品进行检测,其 CV 应小于 12%。
准确性:样品线性回归与预期浓度相关系数 R 值通常应在 0.990 以上,表明检测结果与实际浓度之间具有良好的相关性。
保存条件与有效期
一般保存在 2 - 8℃的环境下,避光保存。
有效期通常为 6 个月左右,具体以试剂盒说明书为准。
上海笃玛生物科技有限公司