猪甲状腺刺激免疫球蛋白(TSI)酶联免疫试剂盒
- 价格: ¥1860/盒
- 发布日期: 2025-08-04
- 更新日期: 2025-08-04
产品详请
产地 |
上海
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保存条件 |
2-8°
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品牌 |
DUMABIO
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货号 |
DM-P7315
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用途 |
科研实验
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检测方法 |
双抗夹心法
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保质期 |
6个月
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适应物种 |
猪
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检测限 |
电询
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数量 |
999
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包装规格 |
48/96T
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标记物 |
电询
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样本 |
电询
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应用 |
科研实验
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是否进口 |
否
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猪甲状腺刺激免疫球蛋白(TSI)酶联免疫试剂盒
产品货号:DM-P7315
产品规格:48/96T
以下是猪甲状腺刺激免疫球蛋白(TSI)酶联免疫试剂盒的详细介绍:
检测原理
通常采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒中的微孔板预先包被有针对猪 TSI 的特异性抗体。加入样品和标准品后,样品中的 TSI 抗原会与包被抗体结合。接着加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体,它会特异性地结合到已与包被抗体结合的 TSI 抗原上,形成 “包被抗体 - TSI 抗原 - HRP 标记检测抗体” 的免疫复合物。加入底物 TMB 后,在 HRP 的催化下,TMB 转化为蓝色产物,加入终止液后变为黄色。颜色的深浅与样品中 TSI 的含量呈正相关,通过酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),再与标准曲线对比,即可计算出样品中 TSI 的浓度。
试剂盒组成
微孔酶标板:已预先包被抗猪 TSI 抗体,有 96 孔或 48 孔等不同规格。
标准品:已知浓度的猪 TSI 蛋白溶液,用于绘制标准曲线,一般包含多个不同浓度梯度。
样本稀释液:用于稀释样品,使样品浓度符合试剂盒的检测范围。
检测抗体 - HRP:HRP 标记的特异性抗体,与 TSI 抗原结合,需稀释后使用。
20× 洗涤缓冲液:使用时需按说明书稀释,用于洗涤酶标板,去除未结合的物质。
底物 A 和底物 B:TMB 底物溶液,在 HRP 的催化下发生显色反应。
终止液:一般为硫酸溶液,用于终止酶促反应,使颜色稳定。
封板膜:用于在温育过程中密封酶标板,防止水分蒸发和外界污染。
说明书:详细介绍试剂盒的使用方法、注意事项、性能指标等信息。
样本要求
可检测猪的血清、血浆、细胞培养上清液等样本。
血清样本:使用不含热原和内毒素的试管,室温血液自然凝固 10 - 20 分钟,2000 - 3000rpm 离心 20 分钟,分离血清和红细胞,收集上清。若不能及时检测,可在 -20℃或 -80℃下保存,避免反复冻融。
血浆样本:根据标本的要求选择 EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 10 - 20 分钟后,2000 - 3000rpm 离心 20 分钟,收集上清。保存条件同血清样本。
细胞培养上清液:用无菌管收集,2000 - 3000rpm 离心 20 分钟,收集上清即可检测,如需保存可置于 -20℃或 -80℃。
操作步骤
准备工作:从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温;按照说明书要求稀释洗涤缓冲液等试剂;准备好酶标仪、恒温箱、移液器等仪器设备。
加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液,余孔分别加标准品或待测样品,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。酶标板加上盖或覆膜,37℃反应一定时间(具体时间参照说明书)。
洗涤:弃去液体,甩干,按说明书要求用洗涤缓冲液洗涤酶标板,通常洗涤 3 - 5 次,每次浸泡时间和甩干方式需严格按照说明书操作,以去除未结合的物质。
加检测抗体:每孔加入适量稀释后的检测抗体 - HRP,37℃孵育一定时间。
再次洗涤:同前一步的洗涤操作,去除未结合的检测抗体 - HRP。
显色:每孔加入底物 A、B 各适量,37℃避光孵育一段时间,使 TMB 在 HRP 的催化下显色。
终止反应:每孔加入终止液,在规定时间内,用酶标仪在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
性能指标
灵敏度:能够检测到的猪 TSI 的 浓度,一般在 pg/mL 或 ng/mL 级别。
特异性:试剂盒中的抗体与猪 TSI 具有高度特异性结合能力,与其他类似蛋白或物质的交叉反应率极低。
精密度:包括批内精密度和批间精密度。批内精密度是指在同一批次试剂盒中,对低、中、高不同浓度的样品进行多次检测,其变异系数(CV)应小于 10%;批间精密度是指在不同批次试剂盒中,对相同样品进行检测,其 CV 应小于 12%。
准确性:样品线性回归与预期浓度相关系数 R 值通常应在 0.990 以上,表明检测结果与实际浓度之间具有良好的相关性。
保存条件与有效期
一般保存在 2 - 8℃的环境下,避光保存。
有效期通常为 6 - 12 个月左右,具体以试剂盒说明书为准。
上海笃玛生物科技有限公司