绵羊分泌型免疫球蛋白（sIgA）酶联免疫试剂盒

产品货号：DM-Sh46029

产品规格：48/96T

以下是绵羊分泌型免疫球蛋白（sIgA）酶联免疫试剂盒的详细介绍：
简介
该试剂盒用于测定绵羊血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中分泌型免疫球蛋白 A（sIgA）的含量，仅用于研究，不用于临床诊断。

实验原理
采用双抗体夹心法。用纯化的绵羊 sIgA 捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体。往包被的微孔中依次加入绵羊 sIgA，再与 HRP 标记的检测抗体结合，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物。经过 洗涤后加底物 TMB 显色，TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的绵羊 sIgA 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中绵羊 sIgA 的含量。

试剂盒组成
48 孔配置：封板膜 2 片、酶标包被板 1×48、标准品 0.3ml×6 管、酶标试剂 5ml×1 瓶、样品稀释液 3ml×1 瓶、显色剂 A 液 3ml×1 瓶、显色剂 B 液 3ml×1 瓶。
96 孔配置：封板膜 2 片、酶标包被板 1×96、标准品 0.3ml×6 管、酶标试剂 10ml×1 瓶、样品稀释液 6ml×1 瓶、显色剂 A 液 6ml×1 瓶、显色剂 B 液 6ml×1 瓶。

样本处理及要求
血清：室温血液自然凝固 10 - 20 分钟，离心 20 分钟左右（2000 - 3000 转 / 分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
血浆：应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10 - 20 分钟后，离心 20 分钟左右（2000 - 3000 转 / 分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
尿液：用无菌管收集，离心 20 分钟左右（2000 - 3000 转 / 分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
细胞培养上清：用无菌容器收集，离心 20 分钟（2000 - 3000 转 / 分）去除颗粒和聚合物。
组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎，3000 转离心 10 分钟取上清。
其他：标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于 - 20℃保存，但应避免反复冻融。

操作步骤
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15 - 30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存，样本在使用前也要在室温平衡 60 分钟。
加样：各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间 控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
温育：用封板膜封板后置 37℃温育。不同试剂盒的温育时间可能有所不同，如有的试剂盒是加标准品或样品后封板静态温育 90 分钟，加生物素 - 抗体工作溶液后封板静态温育 60 分钟，加 HRP - 链霉亲和素结合物（SABC）工作溶液后封板静态温育 30 分钟等。
洗涤：按说明书要求进行洗涤，以去除未结合的物质。
显色：加显色剂，如加 TMB 底物溶液后，封板在 37℃下静态温育 10 - 20 分钟，需准确控制 TMB 显色时间。
终止反应：加入终止液，如硫酸溶液等，终止反应。此时颜色会发生变化，如从蓝色变为黄色。
读数：用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），并通过标准曲线计算样品中绵羊 sIgA 的含量。

试剂盒性能
样品线性回归与预期浓度相关系数 R 值为 0.95 以上。
批内变异系数与批间变异系数应分别小于 10% 和 15%。
保存条件及有效期
试剂盒保存：2 - 8℃。
有效期：6 个月。