绵羊垂体腺苷酸环化酶激活肽38(PACAP-38)酶联免疫试剂盒

产品货号：DM-Sh46008

产品规格：48/96T

绵羊垂体腺苷酸环化酶激活肽 38（PACAP-38）酶联免疫试剂盒是用于定量检测绵羊相关生物样本中 PACAP-38 含量的科研工具，以下是详细介绍：

检测原理：采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被绵羊 PACAP-38 抗体的微孔酶标板中，依次加入标本、标准品、HRP 标记的检测抗体，经过温育并 洗涤，形成固相抗体 - 抗原 - 酶标抗体的夹心复合物。然后加入底物 TMB，TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 PACAP-38 含量呈正相关，用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品浓度。

试剂盒组成：通常包括微孔酶标板、标准品、样本稀释液、检测抗体 - HRP、洗涤缓冲液、底物 A、底物 B、终止液、封板膜、说明书等。

样本要求：血清、血浆、细胞培养上清或组织匀浆等均可作为检测样本。血清采集时需使用不含热原和内毒素的试管，室温血液自然凝固 10-20 分钟后，2000-3000rpm 离心 20 分钟，收集上清；血浆根据标本要求选择 EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后，同样 2000-3000rpm 离心 20 分钟取上清；细胞培养上清直接 2000-3000rpm 离心 20 分钟收集上清；组织匀浆则是将标本采集后用液氮迅速冷冻保存，使用时加入一定量的 PBS 匀浆，再离心取上清。样本收集后若不及时检测，需按一次用量分装，冻存于 - 20℃，避免反复冻融。

操作步骤：实验前需将所有试剂平衡至室温，洗涤液若有结晶需溶解后稀释。然后依次进行加样，包括标准品和样品，加样后进行温育，温育完成后洗涤酶标板，接着加入混合好的底物 A 和底物 B，避光显色一段时间， 加入终止液，用酶标仪在 450nm 波长下测定 OD 值。

注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用；封板膜只限一次性使用，避免交叉污染；底物需避光保存；各步加样应使用加样器并经常校对其准确性，一次加样时间控制在 5 分钟内；每次测定需同时做标准曲线， 做复孔；所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。