绵羊载脂蛋白A5(ApoA5)酶联免疫试剂盒  

产品货号：DM-Sh46004

产品规格：48/96T

以下是绵羊载脂蛋白 A5（ApoA5）酶联免疫试剂盒的详细介绍：

检测原理

通常采用双抗体夹心 ELISA 法。用抗绵羊 ApoA5 抗体包被于酶标板上，实验时样品中的 ApoA5 会与包被抗体结合，游离成分被洗去。然后依次加入生物素化的抗绵羊 ApoA5 抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，再次洗去游离成分。加入显色底物（TMB），TMB 在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在 450nm 波长处测 OD 值，ApoA5 浓度与 OD 值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中 ApoA5 的浓度。

试剂组成

一般包括包被有抗绵羊 ApoA5 抗体的酶标板、绵羊血清稀释液、生物素化的抗绵羊 ApoA5 抗体、辣根过氧化物酶标记的亲和素、底物溶液（TMB）、终止液、阳性对照血清、阴性对照血清等。

操作流程

准备工作：将试剂盒从冰箱取出，恢复至室温（18-25°C），并短暂旋转或离心小瓶。

加样：将标准品和样品加入酶标板孔中，每孔 100μL，密封后在 37°C 下孵育 1 小时。

洗涤：用洗涤缓冲液洗涤酶标板 3-5 次，每次浸泡 1-2 分钟，倒置轻敲在吸水纸上除去液体。

加检测抗体：加入适当稀释的生物素化检测抗体，每孔 100μL，密封后在 37°C 下孵育 1 小时，然后重复洗涤步骤。

加酶标记物：加入适当稀释的链霉亲和素 HRP，每孔 100μL，在 37°C 下培养 30 分钟，之后再次洗涤。

显色：加入底物溶液，每孔 90μL，在 37°C 下避光孵育 10-20 分钟。

终止反应：加入终止液，每孔 50μL，轻敲板的侧面确保完全混合。

结果测定：立即用酶标仪在 450nm 波长下测量各孔的吸光度值，根据标准曲线计算样品中 ApoA5 的浓度。

适用范围

主要用于定量测定绵羊血清、血浆、细胞培养上清或其他相关生物液体中的 ApoA5 含量。

性能指标

特异性：可特异性检测绵羊 ApoA5，与其他类似物无明显交叉反应。

重复性：板内、板间变异系数均应小于 10%。

保存与运输

保存：试剂盒通常应在 2-8℃保存，部分组件可能需要在 - 20℃保存，具体以说明书为准，有效期一般为 6 个月。

运输：一般采用快递发货，运输过程中注意保持低温，避免试剂盒因高温或震荡等因素影响性能。