绵羊钙调磷酸酶(CaN)酶联免疫试剂盒 

产品货号：DM-Sh45988

产品规格：48/96T

绵羊钙调磷酸酶（CaN）酶联免疫试剂盒是一种用于定量检测绵羊相关样本中钙调磷酸酶含量的工具，以下是其详细介绍：

测定原理：通常采用双抗体夹心法。往预先包被绵羊钙调磷酸酶（CaN）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP 标记的检测抗体，经过温育并 洗涤后，用底物 TMB 显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的绵羊钙调磷酸酶（CaN）呈正相关，用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品浓度。

试剂盒组成：一般包括酶标包被板、标准品、酶标试剂、样品稀释液、显色剂 A 液、显色剂 B 液、终止液、20× 浓缩洗涤液等。

样本类型：常见的样本类型有血清、血浆、组织匀浆等。血清需将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 1000×g 离心 20 分钟，取上清即可；血浆用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的 30 分钟内于 2-8℃1000×g 离心 15 分钟，取上清检测；组织匀浆则需用预冷的 PBS 冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎，与对应体积的 PBS 加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨， 将匀浆液离心，取上清检测。

检测范围：试剂盒说明书中明确标注。

操作步骤：

标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL。

加样：在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μL，然后再加待测样品 10μL，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水稀释后备用。

洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。

加酶：每孔加入酶标试剂 50μL，空白孔除外。

温育：同步骤 3。

洗涤：同步骤 5。

显色：每孔先加入显色剂 A 50μL，再加入显色剂 B 50μL，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 15 分钟。

终止：每孔加终止液 50μL，终止反应。

测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值），测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。