绵羊血红素氧化酶2(HO2)酶联免疫试剂盒 

产品货号：DM-Sh45987

产品规格：48/96T

绵羊血红素氧化酶 2（HO2）酶联免疫试剂盒的详细介绍如下：

测定原理：一般采用双抗体夹心法。用纯化的绵羊血红素氧化酶 2 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测样品、标准品，再与 HRP 标记的绵羊血红素氧化酶 2 抗体结合，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物，经过 洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的绵羊血红素氧化酶 2 呈正相关，用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中绵羊血红素氧化酶 2 的浓度。

试剂盒组成：通常包括酶标包被板、标准品、酶标试剂、样品稀释液、显色剂 A 液、显色剂 B 液、终止液、浓缩洗涤液等。

样本类型：常见的有血清、血浆、组织匀浆等。血清需将全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 1000×g 离心 20 分钟，取上清；血浆用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本，并在采集后的 30 分钟内于 2-8℃1000×g 离心 15 分钟，取上清；组织匀浆则需用预冷的 PBS 冲洗组织，去除残留血液，称重后剪碎，与对应体积的 PBS 加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨， 将匀浆液离心，取上清检测。

检测范围：检测范围在 62.5pg/mL - 2000pg/mL 。

操作步骤：

标准品的稀释：根据试剂盒提供的标准品浓度进行稀释，如将原倍标准品依次稀释成不同浓度的标准品。

加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μL，待测样品孔中先加样品稀释液 40μL，然后再加待测样品 10μL，加样时将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水按要求稀释后备用。

洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。

加酶：每孔加入酶标试剂 50μL，空白孔除外。

温育：操作同加样后的温育步骤。

洗涤：同上述洗涤步骤。

显色：每孔先加入显色剂 A 50μL，再加入显色剂 B 50μL，轻轻震荡混匀，37℃避光显色一定时间，如 10 分钟。

终止：每孔加终止液 50μL，终止反应。

测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值），测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。