绵羊双调蛋白(AR)酶联免疫试剂盒

产品货号：DM-Sh45983

产品规格：48/96T

绵羊双调蛋白（AR）酶联免疫试剂盒是一种用于定量检测绵羊体内双调蛋白含量的工具，以下是其详细介绍：

检测原理：基于经典的双抗体夹心法原理。酶标板预先包被有针对绵羊双调蛋白的特异性抗体，当加入待检测样本时，样本中的双调蛋白会与包被抗体结合。然后加入生物素标记的特异性抗体，它会与结合在包被抗体上的双调蛋白进一步结合。 加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素，亲和素与生物素结合，形成抗体 - 抗原 - 生物素抗体 - HRP 亲和素复合物。加入底物溶液后，HRP 催化底物显色，颜色的深浅与样本中双调蛋白的含量成正比，通过酶标仪测定吸光度（OD 值），即可从标准曲线上计算出样本中双调蛋白的浓度。

试剂盒组成：通常包括 30 倍浓缩洗涤液、酶标试剂、酶标包被板、样品稀释液、显色剂 A 液、显色剂 B 液、终止液、标准品、标准品稀释液、说明书、封板膜和密封袋。

检测范围：一般能检测到较低浓度的双调蛋白，试剂盒的检测范围为 1.57-100 ng/ml，灵敏度可达 0.59 ng/ml。

样本类型：适合检测血清、血浆和其他生物体液等。

操作步骤：

准备工作：将试剂盒中的所有试剂和样本恢复至室温，配制好所需的工作液，如洗涤液、标准品工作液、生物素抗体工作液、HRP 标记亲和素工作液等。

加样：设置标准品孔、样本稀释液孔、空白孔和样本孔。标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL，样本稀释液孔加样本稀释液 50μL，空白孔不加，样本孔加待测样本 50μL。

温育：除空白孔外，每孔加入生物素抗体 100μL，用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱避光温育 60min。

洗涤：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复 5 次。

加酶：除空白孔外，每孔加入 HRP 标记亲和素 100μL，用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱避光温育 20min。

再次洗涤：重复步骤 4 的洗涤操作。

显色：将底物 A 和 B 按 1:1 体积充分混合，所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱避光温育 15min。

终止：所有孔加入终止液 50μL。

测定：在 450nm 波长酶标仪上读取各孔吸光度（OD 值），根据标准曲线计算样本中双调蛋白的浓度。

注意事项：实验过程中要注意避免交叉污染，加样时应使用一次性吸头，加样要准确；洗涤要充分，否则会影响检测结果；底物溶液易受污染，应避光妥善保存，若颜色严重变深则必须弃用；终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相同。