产品货号：DM-D9703

产品规格：48/96T

基本信息
方法学：双抗体夹心 ELISA（捕获 Ab + 生物素化检测 Ab + HRP - 链霉亲和素，TMB 显色，450 nm 读板）。
适用样本：血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆、细胞裂解液等（不同试剂盒对基质匹配略有差异）。
预期用途：体外科研定量检测大鼠 NETs，不用于临床诊断。

试剂盒组成（通用）
预包被 96 孔板（可拆卸条）
冻干标准品（通常需复溶后倍比稀释）
生物素化检测抗体（多为 100×）
HRP - 链霉亲和素（100×）
洗涤缓冲液（浓缩，如 20×/30×）
TMB 底物、终止液
通用 / 样品稀释液、封板膜
说明书

典型性能指标
检测范围：常见为 0.156–10 ng/mL。
灵敏度（LOD）：约 0.07–0.08 ng/ml。
精密度：板内 / 板间 CV 一般 <10%。
回收率：样本加标回收率通常在 80%–120%（依基质和水平而变）。
特异性：对大鼠 NETs 特异，与类似物无明显交叉（以说明书为准）。

操作要点（通用流程）
试剂与板平衡至室温（18–25℃），洗涤液按比例稀释并预热溶解结晶（必要时）。
标准品复溶后倍比稀释（如 10、5、2.5、1.25、0.625、0.313、0.156、0 ng/mL），现配现用。
加样 / 标准品，37℃ 孵育（如 90 min），洗板 3 次。
加生物素化检测抗体，37℃ 孵育（如 60 min），洗板 3 次。
加 HRP - 链霉亲和素，37℃ 孵育（如 30 min），洗板 5 次。
加 TMB，37℃ 避光显色约 15 min（依梯度显色调整，不超 30 min）。
加终止液（顺序尽量一致），立即于 450 nm 读 OD；用四参数逻辑曲线计算样本浓度。

样本处理（常见）
血清：室温 1 h 或 2–8℃ 过夜，2–8℃、1000×g 离心 20 min，取上清。
血浆：EDTA / 肝素抗凝，采集后 30 min 内 2–8℃、1000×g 离心 15 min，取上清。
组织匀浆：预冷 PBS 清洗，按约 1:9（w/v）匀浆，可加蛋白酶抑制剂，必要时超声 / 冻融，2–8℃、5000×g 离心 5–10 min，取上清。
细胞培养上清：2–8℃、1000×g 离心 20 min，取上清。

保存与稳定性
未开封板与冻干标准品：-20℃；液体试剂：2–8℃；TMB 与 HRP 链霉亲和素避光保存。
复溶标准品与稀释后试剂尽快使用；用后立即回存。

板条开封后若未用完，干燥密封，-20℃ 可短期保存（以说明书为准）。

注意事项
试剂使用前需平衡至室温；严格按时间与温度孵育。
洗板要充分且避免孔内干燥，必要时用拍干或吸水纸吸干。

底物应为无色；若已变蓝或浑浊，弃用。
封板膜密封孵育，避免蒸发与污染；避免试剂与漂白剂接触。
不同品牌 / 批号组分不得混用；试剂盒外重组蛋白可能不匹配。
样本尽量新鲜；无法立即检测时按一次用量分装，-20℃（短期）或 -80℃（长期）保存，避免反复冻融。

常见问题排查
标准曲线异常：检查复溶、稀释与封板膜密封。
高背景 / 无信号：确认洗板次数与残留；检查底物是否污染或失效。
回收率异常：评估基质效应与加标水平，必要时做基质匹配。