产品货号：DM-D9701

产品规格：48/96T

方法学与用途

• 方法：竞争法 ELISA（包被抗 - NE 抗体；样本 NE 与 HRP - 标记物竞争结合；TMB 显色，450 nm 读板）。
• 适用样本：血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清 / 裂解液等（依试剂盒说明而定）。
• 用途：科研定量检测大鼠 NE，不用于临床诊断。

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试剂盒组成（通用）

• 预包被 96 孔板（可拆卸条）
• 标准品（冻干 / 液体，复溶后梯度稀释）
• HRP - 标记抗原（浓缩，如 100×/1000×）
• 洗涤缓冲液（浓缩，如 10×/20×/50×）
• TMB 底物 A/B、终止液
• 样品 / 通用稀释液、封板膜、说明书

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性能指标（典型范围）

• 检测范围：常见为 62.5–4000 pg/mL 或 78–5000 pg/mL（品牌间波动）。
• 灵敏度（LOD）：约 30–38 pg/mL（随基质与批次而变）。
• 精密度：板内 / 板间 CV 一般 <10%。
• 回收率：常见 80%–120%（不同基质有差异）。
• 特异性：对大鼠 NE 特异，与类似物无明显交叉（以说明书为准）。

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操作要点（通用流程）

1. 试剂与板平衡至室温（18–25℃）；洗涤液按比例稀释并预热溶解结晶（必要时）。
2. 标准品复溶后倍比稀释（如 4000、2000、1000、500、250、125、62.5 pg/mL）。
3. 每孔加样品（必要时稀释）与 HRP - 标记物工作液，37℃ 孵育约 60 min；洗板 3–5 次。
4. 加 TMB 避光显色约 10–15 min（不超 30 min），加终止液后立即于 450 nm 读 OD。
5. 用四参数逻辑曲线计算样本浓度（竞争法为负相关）。

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样本处理要点

• 血清 / 血浆：采集后尽快分离，避免溶血 / 脂血；短期 2–8℃，长期 -20℃（1 个月内）或 -80℃（3 个月内），避免反复冻融。
• 组织匀浆：冰浴匀浆，离心取上清；必要时加蛋白酶抑制剂。
• 细胞培养上清 / 裂解液：离心除沉淀后检测；裂解液需匹配稀释。

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保存与稳定性

• 未开封板与标准品：多为 2–8℃ 或按说明书保存。
• 液体试剂：2–8℃ 避光；HRP 标记物与 TMB 避免反复冻融。
• 开封后：板条干燥密封，按规定条件与期限保存。

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注意事项

• 试剂使用前需室温平衡；洗涤要充分且避免孔内干燥。
• TMB 应为无色；若已变蓝或浑浊，弃用。
• 封板膜密封孵育，避免蒸发与污染；避免试剂与漂白剂接触。
• 不同品牌 / 批号组分不得混用；试剂盒外重组蛋白可能不匹配。
• 高值样本需稀释后重测，并乘以总稀释倍数。

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常见问题排查

• 标准曲线异常：检查复溶、稀释与封板膜密封。
• 高背景 / 无信号：确认洗板次数与残留；检查底物是否污染或失效。
• 回收率异常：评估基质效应与加标水平，必要时做基质匹配。