产品货号：DM-D9700

产品规格：48/96T

方法学与用途

• 双抗体夹心 ELISA，HRP 标记，TMB 显色，450 nm 读板；用于科研定量，不用于诊断。

试剂盒组成（通用）

• 预包被可拆 96 孔板
• 冻干 / 液体标准品（配稀释梯度）
• 浓缩 HRP - 标记物（100×/1000×）
• 浓缩洗涤液（10×/20×/50×）
• TMB A/B、终止液
• 样品 / 通用稀释液、封板膜、说明书

性能指标（常见区间）

• HO-1
  • 检测范围：约 0.15–10 ng/mL（或 0.16–10 ng/mL）
  • 灵敏度：约 0.065–0.11 ng/mL
  • 精密度：板内 / 板间 CV 多 <10%
  • 回收率：约 90%–110%（不同基质波动）
  • 特异性：对大鼠 HO-1 特异，与 HO-2 等无明显交叉
• HO-2
  • 检测范围：约 1.56–100 mIU/mL
  • 灵敏度：约 0.9–1.0 mIU/mL
  • 精密度：CV 多 <10%–15%
  • 特异性：对大鼠 HO-2 特异，与 HO-1 无明显交叉

操作要点（通用流程）

1. 试剂与板室温平衡（18–25℃）；洗涤液预热溶晶后现配。
2. 标准品复溶后倍比稀释（如 10、5、2.5、1.25、0.63、0.32、0.16、0 ng/mL 或对应 mIU/mL）。
3. 每孔加样品 / 标准品与 HRP - 标记物，37℃ 孵育约 60–90 min；洗板 3–5 次。
4. TMB A/B 避光显色约 10–15 min，加终止液后 15 min 内 450 nm 读板。
5. 以四参数 / 线性回归计算浓度，高值样本稀释后重测并乘总稀释倍数。

样本处理

• 血清：室温 1 h 或 2–8℃ 过夜，2–8℃ 1000×g 离心 15–20 min 取上清。
• 血浆：EDTA 或肝素抗凝，2–8℃ 1000×g 离心 15–20 min 取上清。
• 组织匀浆：冰浴匀浆，2–8℃ 1000–1500×g 离心取上清，必要时加蛋白酶抑制剂。
• 细胞培养上清：2–8℃ 1000×g 离心 15–20 min 取上清。
• 保存：短期 2–8℃；长期 -20℃（≤1 个月）或 -80℃（≤3–6 个月），避免反复冻融。

保存与稳定性

• 未开封：2–8℃ 至效期（常见 6 个月）。
• 液体试剂：2–8℃ 避光；HRP - 标记物与 TMB 避免冻融。
• 开封后：板条干燥密封，按规定条件保存。

注意事项

• 试剂用前室温平衡；洗涤充分且避免干板。
• TMB 应为无色；变蓝或浑浊弃用。
• 不同品牌 / 批号组分不得混用；试剂盒外重组蛋白可能不匹配。
• 高值样本需稀释后重测并乘总稀释倍数。

常见问题排查

• 标准曲线异常：检查复溶、稀释与封板膜密封。
• 高背景 / 无信号：确认洗板次数与残留；检查底物是否污染或失效。
• 回收率异常：评估基质效应与加标水平，必要时做基质匹配。

选择建议（科研）

• 先明确目标亚型：HO-1 或 HO-2，避免试剂盒混用。
• 核对样本类型与预期浓度是否落在检测范围内；高浓度样本预留稀释通道。
• 优先选择灵敏度与 CV 更优的试剂盒； 用前做回收率与线性验证。