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产地 | 上海 |
保存条件 | 2-8° |
品牌 | DUMABIO |
货号 | DM-D9696 |
用途 | 科研实验 |
检测方法 | 双抗夹心法 |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | 大鼠 |
检测限 | 电询 |
数量 | 999 |
包装规格 | 48/96T |
标记物 | 电询 |
样本 | 电询 |
应用 | 科研实验 |
是否进口 | 否 |
产品货号:DM-D9696
产品规格:48/96T
基本信息
适用物种:大鼠(Rattus norvegicus)
检测对象:GM2A(GM2 ganglioside activator protein),溶酶体中 GM2 降解的关键辅因子
检测方法:常见双抗体夹心 ELISA(部分为竞争法),HRP 标记,TMB 显色,450 nm 读数
规格:48T/96T(以试剂盒标签为准)
保存与效期:2–8℃,通常 6–12 个月(以试剂盒标签为准)
用途:科研用途,体外定量检测血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等(具体样本类型以说明书为准)
性能指标(通用参考)
检测范围:夹心:约 0.157–10 ng/mL;竞争:约 0.5–10 ng/mL(不同试剂盒有差异)
灵敏度 / 检出限:夹心:约 0.04–0.1 ng/mL;竞争:约 0.5 ng/mL(以说明书为准)
精密度:批内 CV < 10%,批间 CV < 15%(按试剂盒指标执行)
特异性:对 GM2A 具特异性,与结构类似物无明显交叉(以说明书为准)
标准曲线:r ≥ 0.9900(以当次实验曲线为准)
实验要点(通用流程)
样本制备血清:促凝管静置凝固后 1000×g 离心 15–20 min,取上清;-20℃/-80℃ 分装,避免反复冻融
血浆:EDTA 或肝素抗凝,2–8℃ 1000×g 离心 15–20 min,取上清
细胞培养上清:直接或 1000×g 离心 10 min 取上清
组织匀浆:PBS 漂洗后称重,按 1:9(w:v)匀浆,5000×g 5–10 min 取上清
建议预实验确定是否需稀释(常见 1:2 稀释)
试剂准备试剂盒与样本室温平衡 15–30 min;浓缩洗涤液按倍数稀释为 1× 使用;TMB 避光保存
加样与孵育标准品与样本各 50 μL(或按说明书);加 HRP 标记抗体 100 μL;37℃ 孵育 60–90 min(按说明书)
洗涤 4–5 次,拍干;不同试剂盒温育 / 洗涤步骤有差异
显色与读数TMB A/B 各 50 μL,37℃ 避光 15–20 min;加终止液 50 μL;15 min 内 450 nm 读数(必要时 630 nm 参比)
计算以标准曲线拟合并代入样本 OD 计算浓度;高于 标准品需稀释后复测并换算
仪器与耗材
酶标仪:450 nm,必要时 630 nm 参比
加样器与枪头、洗板机 / 洗瓶、恒温箱 / 水浴锅、离心机
注意事项
不同试剂盒在方法学(夹心 vs 竞争)、标准品单位与稀释方案、温育 / 洗涤步骤上存在差异,务必以当次说明书为准
避免溶血、高脂样本;试剂与样本充分复温,严格按顺序与时间操作
底物避光、终止液注意防护;未用完板条密封 2–8℃ 保存
选择与验证建议
明确样本类型与预期浓度范围,优先选择覆盖该区间且灵敏度达标的试剂盒
关注方法学差异:夹心通常灵敏度更高;竞争法适用于小分子半抗原检测
每批实验同步绘制标准曲线并进行精密度验证(批内 / 批间),确保 CV 达标