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产地 | 上海 |
保存条件 | 2-8° |
品牌 | DUMABIO |
货号 | DM-D9693 |
用途 | 科研实验 |
检测方法 | 双抗夹心法 |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | 大鼠 |
检测限 | 电询 |
数量 | 999 |
包装规格 | 48/96T |
标记物 | 电询 |
样本 | 电询 |
应用 | 科研实验 |
是否进口 | 否 |
大鼠(Rat)超氧化物歧化酶(SOD)ELISA检测试剂盒
产品货号:DM-D9693
产品规格:48/96T
原理与适用
双抗体夹心:包被抗大鼠 SOD 抗体,加入样本与 HRP 标记检测抗体,TMB 显色后 OD450 与 SOD 浓度正相关,适用于 “总 SOD” 检测。
竞争法(SOD1):样本 SOD1 与包被抗原竞争生物素化检测抗体,再与 HRP - 链霉亲和素反应,适合低丰度 SOD1 的定量。
样本采集与处理(通用)
血清:室温凝固 10–20 分钟,1000×g 离心 20 分钟取上清;-20℃/-80℃ 分装保存,避免反复冻融。
血浆:EDTA / 肝素 / 柠檬酸钠抗凝,2–8℃ 1000×g 离心 15–20 分钟;-20℃/-80℃ 保存。
组织:预冷 PBS 洗净,按约 1:9 w/v 匀浆,超声破碎,5000×g 离心取上清;-20℃ 保存。
细胞培养上清:2–8℃ 1000×g 离心 15–20 分钟;-20℃ 保存。
关键:避免使用叠氮钠(NaN3)作防腐剂,否则抑制 HRP。
试剂盒组成(通用)
预包被微孔板(96 孔,可拆卸条)。
标准品与稀释液。
样本稀释液、浓缩洗涤液(需稀释)。
HRP 标记检测抗体 / 酶结合物(或生物素化抗体 + HRP - 链霉亲和素)。
TMB 显色剂 A/B、终止液(硫酸)。
封板膜、说明书。
操作流程(通用)
试剂与样本室温平衡;稀释洗涤液与工作液。
标准品与样本加样,37℃ 孵育 30–60 分钟。
洗板 3–5 次;加酶结合物,37℃ 孵育 30–60 分钟。
洗板后加 TMB,37℃ 避光显色 10–15 分钟;加终止液转黄。
450 nm 读数(可设 630 nm 校正),由标准曲线计算浓度。
提示:若 OD 超出标准曲线,需先稀释样本后重测,并乘以总稀释倍数。
性能验证要点
标准曲线线性:r ≥ 0.990。
灵敏度:以零标准 OD 均值 + 2SD 对应浓度评估。
精密度:批内 / 批间 CV 符合试剂盒宣称。
回收率:添加回收率 85%–115%(血清 / 血浆 / 培养基等)。
特异性:与常见同工酶 / 结构类似物无显著交叉。
稀释线性:梯度稀释样本回收率在合理区间。
选购与实验建议
明确检测目标:总 SOD(夹心)或 SOD1(竞争)。
依据样本类型与预期浓度选择检测范围与灵敏度匹配的试剂盒。
关注关键性能指标:线性、精密度、回收率、稀释线性与特异性。
实验设置:每板做标准曲线与复孔;先预实验确认稀释倍数;避免使用叠氮钠。