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产地 | 上海 |
保存条件 | 2-8° |
品牌 | DUMABIO |
货号 | DM-D9690 |
用途 | 科研实验 |
检测方法 | 双抗夹心法 |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | 大鼠 |
检测限 | 电询 |
数量 | 999 |
包装规格 | 48/96T |
标记物 | 电询 |
样本 | 电询 |
应用 | 科研实验 |
是否进口 | 否 |
大鼠(Rat)尿氨酸(Kynurenine)ELISA检测试剂盒
产品货号:DM-D9690
产品规格:48/96T
大鼠 Kynurenine(KYN)ELISA 多采用双抗体夹心法定量,适用于血清、血浆、组织匀浆、唾液、细胞裂解液、卵泡液等;常见检测范围约 7.8–500 pmol/mL,灵敏度约 3.5 pmol/mL,批内 CV<8%,批间 CV<10–15%。
方法学与适用
原理:预包被捕获抗体 + 标本 + HRP 标记检测抗体(或生物素化抗体 + HRP - 链霉亲和素),TMB 显色,OD450 与 KYN 浓度呈正相关;定量依据标准曲线。
适用样本:血清、血浆(EDTA / 肝素)、组织匀浆、唾液、细胞裂解液、卵泡液等;科研专用。
样本类型与处理
血清:室温凝固 2 小时或 4℃ 过夜,1000×g 20 分钟;尽快检测或 -20℃/-80℃ 分装,避免反复冻融。
血浆:EDTA 或肝素抗凝,2–8℃ 1000×g 15 分钟;-20℃/-80℃ 保存。
组织匀浆:预冷 PBS 冲洗,按 1:9–1:20 w/v 匀浆,超声 / 冻融破碎,5000×g 5–10 分钟取上清;含高内源过氧化物酶组织可先 1% H2O2 室温 15 分钟灭活以降背景。
细胞培养上清:4℃ 1000×g 20 分钟取上清。
保存与注意:短期 4℃,长期 -20℃/-80℃;避免溶血;NaN3 抑制 HRP,勿用。
试剂盒组成(通用)
预包被板(96 孔,可拆卸条)。
冻干 / 液体标准品与稀释液。
生物素化检测抗体或 HRP 标记检测抗体(浓缩,需稀释)。
样本 / 抗体 / 酶稀释液、洗涤液(多为 20×/25×,现用现配)。
TMB 显色液 A/B、终止液(硫酸)。
封板膜、说明书。
操作流程(通用)
试剂与样本室温平衡;稀释洗涤液与工作液。
标准品与样本各 50–100 μL / 孔,37℃ 孵育 30–60 分钟。
洗板 3–5 次;加生物素化抗体或 HRP 标记抗体工作液,37℃ 30–60 分钟。
洗板后加 HRP - 链霉亲和素(若为生物素体系)或直接显色;37℃ 30–60 分钟。
洗板后加 TMB,37℃ 避光显色 10–15 分钟;加终止液转黄。
450 nm 读数(可设 630 nm 校正),由标准曲线计算浓度(多为四参数拟合)。
性能指标(区间示例)
检测范围:7.8–500 pmol/mL(部分 15.6–1000 pmol/mL)。
灵敏度:约 3.5 pmol/mL(部分 <10 pmol/mL)。
精密度:批内 CV<8%,批间 CV<10–15%。
回收率:常见加标回收率在可接受区间(依试剂盒)。
特异性:对大鼠 KYN 特异性良好,与结构类似物无明显交叉。
稀释线性:梯度稀释样本回收率在合理区间。