关键信息一览

• 方法学：双抗体一步夹心法 ELISA；TMB 显色，450 nm 读数。
• 检测范围：0.5–16 μmol/L。
• 灵敏度： 检测浓度 < 0.1 μmol/L。
• 特异性：对常见结构类似物无明显交叉反应。
• 重复性：板内 CV < 10%；板间 CV < 15%。
• 样本类型：血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等。
• 上样量：常见 50 μL；超上限用样本稀释液稀释后重测。
• 标准品：6 点，如 16、8、4、2、1、0.5 μmol/L（以说明书为准）。
• 仪器：酶标仪（450 nm）。
• 保存与效期：2–8℃，6 个月；使用前室温平衡 20–25℃。

试剂盒组分（示例）

• 预包被微孔板（96 孔 / 48 孔）
• 标准品（6 管）
• HRP 标记检测抗体
• 20× 洗涤缓冲液、TMB 底物、终止液等
• 样本稀释液等（具体以说明书为准）

实验流程要点

1. 试剂与样本室温平衡；1× 洗涤缓冲液临用现配。
2. 加样：标准品与样本各 50 μL / 孔；超上限稀释后重测。
3. 加 HRP 标记抗体，按规定温育与洗涤。
4. 加 TMB 显色，适时加终止液，450 nm 读 OD。
5. 以标准品 OD 绘制曲线，计算样本浓度。

样本处理与保存

• 血清 / 血浆：常规离心取上清；短期 4℃，长期 -20℃/-80℃，避免反复冻融；溶血样本可能干扰。
• 组织匀浆 / 细胞上清：离心取上清；保存同上。
• 外观：应清澈透明；如有悬浮物，先离心再上样。

性能与质量控制

• 灵敏度与检测范围需覆盖目标样本区间。
• 特异性：对结构类似物交叉反应应可忽略。
• 重复性：板内 CV < 10%，板间 CV < 15%，用于批内 / 批间质控。

注意事项

• 严格按温度与时间温育；试剂使用前恢复室温。
• 充分洗涤并拍干板底残留与指纹，避免影响 OD。
• 避免试剂与样本交叉污染；操作与保存避免强光直射。
• 试剂盒仅供科研使用，不用于临床诊断。