大鼠硫酸软骨素(CS)ELISA 科研试剂盒用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等样本中的 CS 含量,采用双抗体夹心 ELISA 原理,标准曲线法计算浓度,2–8℃保存,有效期约 6 个月。
- 预包被 CS 抗体微孔板(96T/48T)
- CS 标准品(如 2.5–80 μg/mL 6 点)
- 检测抗体 - HRP / 生物素标记抗体 + 亲和素 - HRP
- 20×/50× 洗涤缓冲液、样本稀释液、TMB 底物 A/B、终止液、封板膜
- 包被抗体捕获样本中的 CS,HRP 标记抗体形成 “夹心”;TMB 显色后加酸终止,450 nm 测 OD,与 CS 浓度呈正相关。
- 血清:室温 2 h 或 4℃过夜后 1000×g 20 min 取上清;短期 4℃,长期 - 20℃/-80℃分装,避免反复冻融。
- 血浆:EDTA / 肝素抗凝,2–8℃ 1000×g 15 min 取上清;保存同血清。
- 组织匀浆:PBS(含蛋白酶抑制剂)匀浆,5000×g 5–10 min 取上清。
- 细胞上清:1000×g 20 min 取上清。
- 室温平衡试剂;设空白、标准品与样本复孔。
- 加样后 37℃孵育→洗涤 3–4 次。
- 加 HRP 结合物,37℃孵育→洗涤。
- 加 TMB 避光显色(如 10 min)→加终止液后立即 450 nm 读板。
- 以标准品浓度对 OD 值绘制曲线,计算样本浓度。
- 检测范围:如 2.5–80 μg/mL;灵敏度:<0.1 μg/mL。
- 特异性:对结构类似物无明显交叉。
- 重复性:板内 CV<10%,板间 CV<15%。
- 线性相关系数:R≥0.990。
- 所有试剂使用前需室温平衡;洗涤要充分,避免残留影响 OD。
- TMB 底物 B 对光敏感,显色应避光;加终止液后尽快读数。
- 样本若高于 标准品,用配套样本稀释液稀释后重测。
- 试剂盒仅供科研使用,不用于诊断;不可混用其他厂家组分。