基本信息

• 适用物种：大鼠（Rattus norvegicus）
• 方法学：双抗体夹心 ELISA，HRP 标记，TMB 显色，450 nm 测定
• 样本类型：血清、血浆、细胞培养上清、细胞 / 组织裂解液、其他生物体液等
• 保存与效期：2–8℃，约 6 个月；不同批号不宜混用

试剂盒组成（示例，以说明书为准）

• 预包被 Adropin 抗体微孔板（96T/48T）
• Adropin 标准品（常见 6–7 点）
• HRP 标记 Adropin 抗体（酶标试剂）
• 浓缩洗涤液、样本稀释液、标准品稀释液
• TMB 显色液 A/B、终止液、封板膜、密封袋、说明书

检测原理

• 包被抗体捕获样本中的 Adropin，HRP 标记抗体形成 “夹心”；TMB 显色后加酸终止，450 nm 测 OD，与 Adropin 浓度呈正相关。

样本类型与处理

• 血清：室温凝固或 4℃ 过夜，1000×g 15–20 min 取上清；短期 4℃，长期 -20℃/-80℃ 分装，避免反复冻融。
• 血浆：EDTA / 肝素抗凝，2–8℃ 1000×g 15–20 min 取上清；保存同血清。
• 组织匀浆：PBS（含蛋白酶抑制剂）匀浆，5000×g 5–10 min 取上清。
• 细胞培养上清：1000×g 10–20 min 取上清。

操作要点（简版）

1. 试剂室温平衡；设空白、标准品与样本复孔。
2. 加样后 37℃ 孵育（如 60 min）→洗涤 5 次。
3. 加酶标试剂，37℃ 孵育（如 60 min）→洗涤。
4. 加 TMB A/B 各 50 μL，37℃ 避光显色（如 15 min）；加终止液（50 μL）后 15 min 内于 450 nm 读板。
5. 以标准品浓度对 OD 值绘制曲线，计算样本浓度；若先做 n 倍稀释，结果 ×n。

性能指标（典型范围，以说明书为准）

• 检测范围：常见约 0.156–10 ng/mL 或 15.6–1000 pg/mL
• 灵敏度：约 0.09–0.1 ng/mL 或 9.4 pg/mL
• 精密度：板内 CV<10%–15%，板间 CV<15%（典型值）
• 特异性：对结构类似物交叉反应低；说明书提供交叉数据

注意事项

• 试剂使用前室温平衡；洗涤充分并拍干，避免残留影响 OD。
• TMB 底物 B 对光敏感，显色避光；加终止液后尽快读数（如 15 min 内）。
• 若样本 OD 高于标准品上限，先用样本稀释液稀释后重测。