基本信息

• 检测对象：大鼠 MHPG（3-Methoxy-4-hydroxyphenylglycol）
• 方法学：双抗体夹心 ELISA，HRP 标记，TMB 显色，450 nm 测定
• 适用样本：血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等
• 保存与效期：2–8℃，有效期约 6 个月；不同批号不得混用

试剂盒组成（示例，以说明书为准）

• 预包被 MHPG 抗体微孔板（96T/48T）
• MHPG 标准品（如 240 pg/mL 1 支，可稀释成 7.5–120 pg/mL 6 点）
• HRP 标记 MHPG 抗体（酶标试剂）
• 20×/30× 浓缩洗涤液、样品稀释液、标准品稀释液
• TMB 显色液 A/B、终止液、封板膜、密封袋、说明书

检测原理

• 包被抗体捕获样本中的 MHPG，HRP 标记抗体形成 “夹心”；TMB 显色后加酸终止，450 nm 测 OD，与 MHPG 浓度呈正相关。

样本类型与处理

• 血清：室温凝固 2 h 或 4℃ 过夜，1000×g 20 min 取上清；短期 4℃，长期 -20℃/-80℃ 分装，避免反复冻融。
• 血浆：EDTA / 肝素抗凝，2–8℃ 1000×g 15–20 min 取上清；保存同血清。
• 组织匀浆：PBS（含蛋白酶抑制剂）匀浆，5000×g 5–10 min 取上清。
• 细胞上清：1000×g 20 min 取上清。
• 注意：避免使用含叠氮钠（NaN3）的样本，因其会抑制 HRP。

操作要点（简版）

1. 试剂室温平衡；设空白、标准品与样本复孔。
2. 加样后 37℃ 孵育 30 min→洗涤 5 次。
3. 加酶标试剂，37℃ 孵育 30 min→洗涤 5 次。
4. 加 TMB A/B 各 50 μL，37℃ 避光显色 15 min；加终止液（50 μL）后 15 min 内于 450 nm 读板。
5. 以标准品浓度对 OD 值绘制曲线，计算样本浓度（如样本先做 n 倍稀释，结果 ×n×5）。

性能指标（典型，以说明书为准）

• 检测范围：如 5–150 pg/mL（以 6 点 7.5–120 pg/mL 标准曲线为例）
• 灵敏度：<1 pg/mL（举例）
• 精密度：板内 CV≤10%，板间 CV≤15%（举例）
• 特异性：对结构类似物交叉反应低（以说明书数据为准）

注意事项

• 试剂使用前室温平衡 15–30 min；洗涤充分并拍干，避免残留影响 OD。
• TMB 底物 B 对光敏感，显色避光；加终止液后尽快读数（建议 15 min 内）。
• 若样本 OD 高于标准品上限，先用样品稀释液稀释后重测。