大鼠二氢生物蝶呤(BH2)ELISA 试剂盒是用于体外定量检测大鼠生物液体中 BH2 浓度的常用工具,以下是其详细介绍:
检测原理:采用双抗体夹心 ELISA 法。将特异性抗大鼠 BH2 抗体包被于 96 孔微孔板中,加入标准品或标本,使其中的 BH2 与固相抗体结合,然后加入辣根过氧化物酶标记的抗大鼠 BH2 抗体,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物。洗涤去除未结合的酶标抗体后,加入 TMB 底物显色,TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色,颜色的深浅和样品中的 BH2 蛋白含量呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
试剂盒组成:包括 96 孔酶标板、4 个板盖、2 瓶标准品、1 瓶 20mL 标准品稀释液、1 瓶 120μL 检测试剂 A、1 瓶 12mL 检测试剂稀释液 A、1 瓶 120μL 检测试剂 B、1 瓶 12mL 检测试剂稀释液 B、1 瓶 9mL TMB 底物、1 瓶 6mL 终止液、1 瓶 20mL 洗涤缓冲液(30× 浓缩液)和 1 份说明书。
样本要求:可检测大鼠的血清、血浆、尿液及相关体液。血清标本需将全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜,然后 1000×g 离心 20 分钟,取上清;血浆标本需用枸橼酸盐或肝素作为抗凝剂采集标本,并在采集后的 30 分钟内于 2-8℃ 1000×g 离心 15 分钟,取上清;尿液标本用无菌管收集,1000×g 离心 20 分钟,取上清。所有标本均需密封保存,4℃保存应小于 1 周,-20℃保存小于 6 个月,且应避免反复冻融,溶血标本不宜进行此项检测。血清和血浆样本建议原液 10 倍稀释后检测,尿液建议样本原液检测,其它生物标本请根据预计含量选择合适的稀释倍数。
主要技术参数:检测范围为 0.156-10ng/mL,灵敏度可达 0.078ng/mL 。
储存条件:试剂盒各组分应在 2-8℃条件下密封避光保存。