大鼠 II 型前胶原羧基端原肽(PIICP)ELISA 试剂盒是一种用于定量检测大鼠血清、血浆等生物样品中 PIICP 含量的工具,以下是其详细介绍:
包装规格:常见的有 48T 和 96T 两种。
种属:大鼠。
检测方法:双抗体夹心法。
保存条件:冷藏 2-8℃。
保质期:6 个月。
试剂盒组成:酶标包被板:1×48 或 1×96,包被有抗大鼠 PIICP 抗体。
标准品:通常为已知浓度的 PIICP,如 3600ng/L,0.5ml×1 瓶。
标准品稀释液:1.5ml×1 瓶,用于稀释标准品。
酶标试剂:辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗 PIICP 抗体,3ml×1 瓶或 6ml×1 瓶。
样品稀释液:3ml×1 瓶或 6ml×1 瓶,用于稀释样品。
显色剂 A 液:3ml×1 瓶或 6ml×1 瓶。
显色剂 B 液:3ml×1 瓶或 6ml×1 瓶。
终止液:3ml×1 瓶或 6ml×1 瓶。
浓缩洗涤液:(20ml×20 倍)×1 瓶或(20ml×30 倍)×1 瓶。
说明书:1 份。
封板膜:2 片(48T)或 2 片(96T)。
密封袋:1 个。
检测原理:用纯化的大鼠 PIICP 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大鼠 PIICP,再与 HRP 标记的 PIICP 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过 洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 PIICP 呈正相关,用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠 PIICP 的浓度。
标本要求:血清:室温血液自然凝固 10-20 分钟,离心 20 分钟左右(2000-3000 转 / 分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
血浆:应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心 20 分钟左右(2000-3000 转 / 分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
其他:尿液、细胞培养上清、胸腹水、脑脊液等样本参照血清或血浆的处理方法,组织标本则需切割后称取重量,加入 PBS 匀浆,离心后取上清备用。不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 会抑制辣根过氧化物酶的活性。
检测范围和灵敏度:试剂盒检测范围为 0.6μg/L -60μg/L,灵敏度为 95%。
适用范围:仅供科研使用,不得用于临床诊断,可用于研究大鼠体内 PIICP 在软骨代谢、关节疾病等过程中的作用等。