大鼠抗生长激素抗体(GHAb)ELISA 试剂盒是用于定量检测大鼠血清、血浆等样本中 GHAb 含量的工具,以下是其详细介绍:
基本信息:规格:常见有 48T 和 96T 两种。
种属:大鼠。
检测方法:双抗体夹心法。
保存条件:2-8℃。
有效期:通常为 6 个月。
试剂盒组成:酶标板:包被有抗大鼠 GHAb 抗体。
标准品:已知浓度的 GHAb,用于绘制标准曲线,一般为冻干品,临用前以样品稀释液稀释。
样品稀释液:用于稀释样品和标准品。
检测抗体:生物素化的抗大鼠 GHAb 抗体和辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素(或 HRP 标记的抗大鼠 GHAb 抗体)。
洗涤缓冲液:多为浓缩液,使用时需按比例稀释。
底物溶液:如 TMB,用于显色反应。
终止液:一般为 2N H?SO?,用于终止显色反应。
说明书:包含操作步骤、注意事项、结果计算等详细信息。
检测原理:用抗大鼠 GHAb 抗体包被酶标板,加入待检样本或标准品,样本中的 GHAb 与包被抗体结合。洗涤后,加入生物素化的抗大鼠 GHAb 抗体,再孵育形成免疫复合物,然后加入 HRP 标记的亲和素,再次洗涤后加入显色底物 TMB,TMB 在 HRP 催化下显色,颜色深浅与样本中 GHAb 浓度呈正比,通过酶标仪在 450nm 波长处测定吸光度,根据标准曲线计算样本中 GHAb 的浓度。
标本要求:血清:全血标本于室温放置 2 小时或 4℃过夜后,1000g 离心 20 分钟,取上清,可 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。
血浆:可用 EDTA 或肝素抗凝,标本采集后 30 分钟内于 2-8℃、1000g 离心 20 分钟,取上清检测,保存条件同血清。
组织匀浆:用预冷的 PBS 冲洗组织,去除残留血液,称重后剪碎,按 1:9 的重量体积比加入 PBS,于冰上研磨,可超声破碎或反复冻融,5000g 离心 5-10 分钟,取上清检测。
细胞培养物上清:1000g 离心 20 分钟,取上清即可,保存条件同前。
技术参数:检测范围:一般为 0.625-40ng/mL。
灵敏度:通常为 0.375ng/mL。
适用范围:仅供科研实验使用,不得用于临床诊断。