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产地 | 上海 |
保存条件 | 2-8° |
品牌 | DUMABIO |
货号 | DM-Cat6814 |
用途 | 科研实验 |
检测方法 | 双抗夹心法 |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | 牛 |
检测限 | 电询 |
数量 | 999 |
包装规格 | 48/96T |
标记物 | 电询 |
样本 | 电询 |
应用 | 科研实验 |
是否进口 | 否 |
产品货号:DM-Cat6814
产品规格:48/96T
牛循环免疫复合物(CIC)酶联免疫试剂盒是用于体外定量检测牛血清、血浆、组织匀浆等样本中 CIC 含量的工具,以下是其详细介绍:
检测原理:通常采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有牛 CIC 捕获抗体的微孔中,依次加入标本、标准品、HRP 标记的检测抗体,经过温育并 洗涤后,用底物 TMB 显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色,颜色的深浅和样品中的牛 CIC 呈正相关。通过酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
试剂盒组成:一般包含微孔酶标板(96 孔或 48 孔)、CIC 标准品(浓度依次为 20、10、5、2.5、1.25、0.625μg/ml 等)、样本稀释液、HRP 标记的检测抗体、20× 洗涤缓冲液(使用时需按说明书进行稀释)、底物 A、底物 B、终止液、封板膜、说明书和自封袋。
样本类型:主要有血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清及其他生物体液等。血清需将全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜,然后 1000×g 离心 20 分钟取上清;血浆用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并在采集后的 30 分钟内于 2-8℃ 1000×g 离心 15 分钟取上清;组织匀浆则需用预冷的 PBS 冲洗组织,剪碎后按一定比例与 PBS 加入玻璃匀浆器中于冰上研磨,再经过超声破碎或反复冻融, 5000×g 离心 5-10 分钟取上清。
检测范围:需参考试剂盒说明书。
灵敏度:需参考试剂盒说明书。
操作步骤:先从室温平衡 60min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条密封放回 4℃。然后设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL,样本孔中加入待测样本 50μL,空白孔不加。除空白孔外,每孔加入 HRP 标记的检测抗体 100μL,用封板膜封住反应孔,37℃温育 60min。接着弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩去洗涤液,吸水纸上拍干,重复洗板 5 次。之后每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min,再每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值,依据标准曲线计算样本中 CIC 的含量。
保存条件:一般要求在 2-8℃条件下保存,有效期通常为 6 个月,具体以试剂盒说明书为准。保存过程中要避免光照、高温、潮湿等因素影响。
上海笃玛生物科技有限公司