大鼠II型前胶原氨基端原肽(PIINP)ELISA检测试剂盒

产品货号：DM-D9647

产品规格：48/96T

大鼠 II 型前胶原氨基端原肽（PIINP）ELISA 检测试剂盒是用于检测大鼠体内 PIINP 含量的常用工具，以下是其详细介绍：
检测原理：通常采用双抗体夹心 ELISA 法。将特异性抗大鼠 PIINP 抗体包被于 96 孔微孔板中，加入标准品和待测标本，使其中的 PIINP 与固相抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗 PIINP 抗体，形成抗体 - PIINP - 标记抗体复合物，洗涤去除未结合的标记抗体后，加入 TMB 底物显色，TMB 在 HRP 催化下转化为蓝色，在酸的作用下转化为黄色，颜色深浅与样品中 PIINP 含量呈正相关，通过酶标仪测定吸光度值，计算样品浓度。
试剂盒组成：酶标包被板：通常有 48 孔或 96 孔两种规格，包被有抗大鼠 PIINP 抗体。
标准品：一般为 1 瓶，浓度通常为 3600ng/L，可根据标准品稀释液进行梯度稀释，用于绘制标准曲线。
标准品稀释液：1.5ml×1 瓶，用于稀释标准品。
酶标试剂：即 HRP 标记的抗 PIINP 抗体，3ml×1 瓶（48 孔配置）或 6ml×1 瓶（96 孔配置）。
样品稀释液：用于稀释待检测的样品，3ml×1 瓶（48 孔配置）或 6ml×1 瓶（96 孔配置）。
显色剂 A 液：一般为无色液体，3ml×1 瓶（48 孔配置）或 6ml×1 瓶（96 孔配置）。
显色剂 B 液：一般为无色或淡黄色液体，3ml×1 瓶（48 孔配置）或 6ml×1 瓶（96 孔配置）。
终止液：3ml×1 瓶（48 孔配置）或 6ml×1 瓶（96 孔配置），通常为 2M 硫酸溶液。
浓缩洗涤液：（20ml×20 倍）×1 瓶（48 孔配置）或（20ml×30 倍）×1 瓶（96 孔配置），使用时需按说明书稀释。
封板膜：2 片（48 孔配置）或 2 片（96 孔配置）。
说明书：1 份，包含操作步骤、注意事项、性能指标等信息。
样本类型：常见的样本类型包括血清、血浆、组织匀浆等生物体液。
操作步骤：标准品稀释：根据说明书将标准品用标准品稀释液进行梯度稀释。
加样：在酶标包被板的标准品孔和样品孔中分别加入标准品和稀释后的样品，每孔加样量一般为 100μl，空白孔除外。
温育：用封板膜封板后，置于 37℃温育一定时间，如标准品温育 2 小时，加酶后温育 1 小时等。
洗涤：弃去孔内液体，用洗涤缓冲液洗涤微孔板，一般洗涤 3-5 次。
加酶：每孔加入酶标试剂，空白孔除外，然后再次温育。
显色：每孔先加入显色剂 A 液，再加入显色剂 B 液，轻轻震荡混匀，在 37℃避光显色 10-20 分钟。
终止：每孔加入终止液，终止反应。
测定：以空白空调零，在 450nm 波长下依序测量各孔的吸光度（OD 值），根据标准曲线计算样品中 PIINP 的浓度。
保存条件：一般应保存在 2-8℃，避免阳光直射，在规定的有效期内使用，有效期通常为 6 个月。