产品货号：DM-Cat6802

产品规格：48/96T

牛凝血酶原前体蛋白（PIVKA-II）酶联免疫试剂盒是一种用于体外定量检测牛血清、血浆或其他相关生物液体中 PIVKA-II 浓度的工具，以下是其详细介绍：
检测原理：该试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）原理。在预包被抗牛 PIVKA-II 抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入牛 PIVKA-II 校准品和待测样本，再加入另一株 HRP 标记的抗牛 PIVKA-II 抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体 - 抗原 - 酶标抗体的夹心复合物。然后加入底物 A 和 B，底物在 HRP 催化下，产生蓝色产物，在终止液作用下，最终转化为黄色。在酶标仪 450nm 波长上测定吸光度（OD 值），吸光度（OD 值）与待测样品中牛 PIVKA-II 的浓度正相关，通过拟合校准品曲线，可以计算出样本中牛 PIVKA-II 的浓度。
试剂盒组成：通常包括微孔酶标板、标准品、样本稀释液、检测抗体 - HRP、洗涤缓冲液、底物 A、底物 B、终止液、封板膜、说明书、自封袋等。
样本要求：一般可检测血清、血浆等生物液体。血清样本需使用不含热原和内毒素的试管，收集血液后，3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离；血浆样本可用 EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，3000 转离心 30 分钟取上清。如果样本收集后不及时检测，应按一次用量分装，冻存于 - 20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
操作步骤：从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃；设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL，样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL，空白孔不加；除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min；弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 5 次；每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min；每孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
试剂盒性能：准确性方面，标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值通常大于等于 0.9900；灵敏度较高， 检测浓度一般小于某个特定值，如小于 1.0AU/ml；特异性良好，不与其它可溶性结构类似物交叉反应；重复性方面，板内、板间变异系数均小于 15%。
储存条件：一般保存在 2-8℃，避光防潮保存，有效期通常为 6 个月。

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