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| 产地 | 上海 |
| 保存条件 | 2-8° |
| 品牌 | DUMABIO |
| 货号 | DM-Cat6799 |
| 用途 | 科研实验 |
| 检测方法 | 双抗夹心法 |
| 保质期 | 6个月 |
| 适应物种 | 牛 |
| 检测限 | 电询 |
| 数量 | 999 |
| 包装规格 | 48/96T |
| 标记物 | 电询 |
| 样本 | 电询 |
| 应用 | 科研实验 |
| 是否进口 | 否 |
产品货号:DM-Cat6799
产品规格:48/96T
牛胰岛素(INS)酶联免疫试剂盒是一种用于体外定量检测牛血清、血浆、组织匀浆等生物液体中胰岛素含量的工具。以下是其详细介绍:
检测原理:通常采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。将牛胰岛素(INS)抗原包被于酶标板上,加入样本、标准品和生物素标记的抗体,样本中的 INS 与包被抗原竞争性地与生物素标记抗体结合,然后加入酶结合物后形成免疫复合物,洗涤去除未结合的成分,加入 TMB 显色液后显蓝色,加入终止液变黄色。颜色的深浅和样品中的牛胰岛素(INS)呈反比,用酶标仪在 450nm 处测 OD 值,通过绘制标准曲线计算出标本中 INS 的浓度。
试剂盒组成:以 96 孔配置为例,通常包含预包被 96 孔酶标板 8 孔 ×12 条、标准品 2 支、通用稀释液 2×20mL、浓缩 Biotin - 抗体 60μL、浓缩酶结合物 120μL、20× 洗涤液 2×10mL、底物(TMB)10mL、终止液 6mL、封板膜 4 张、说明书 1 份。
样本要求:血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜,然后 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可,或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。
血浆:用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的 30 分钟内于 2 - 8℃1000×g 离心 15 分钟,取上清即可检测,或将上清置于 - 20℃或 - 80℃保存,但应避免反复冻融。
组织匀浆:用预冷的 PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎,按 1:9 的重量体积比加入 PBS,加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨,可对匀浆液进行超声破碎或反复冻融, 将匀浆液于 5000×g 离心 5 - 10 分钟,取上清检测。
操作步骤:试剂准备:提前 20 分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。将浓缩洗涤液用蒸馏水按 1:20 稀释。取出标准品,加入 1mL 标准品及样品稀释液溶解,然后进行倍比稀释。
加样:在预包被酶标板中加入标准品和待测样品,37℃孵育适当时间。
洗涤:弃去孔内液体,用洗涤液洗涤板孔多次,每次静置 1 - 3 分钟,甩去洗涤液,吸水纸上拍干。
加酶结合物:加入生物素标记抗体工作液和酶结合物工作液,37℃孵育。
显色:加入 TMB 显色液,37℃避光孵育 10 - 20 分钟,然后加入终止液。
测定:立即用酶标仪在 450nm 波长处测定各孔的吸光度值。
试剂盒性能:
检测范围: 3.89 - 2200pg/mL。
灵敏度:18.08pg/mL。
特异性:可检测样品中的牛 INS,且与其它类似物无明显交叉反应。
重复性:板内、板间变异系数均<10%。
储存条件:通常保存在 2 - 8℃,避光防潮保存,有效期一般为 6 个月。
上海笃玛生物科技有限公司