产品货号：DM-Cat6779

产品规格：48/96T

牛 25 羟基维生素 D（25 (OH) D）酶联免疫试剂盒是用于检测牛血清、血浆等样本中 25 (OH) D 含量的科研工具，具体介绍如下：
基本信息

规格：48/96T。
检测方法：通常采用竞争酶联免疫法。
检测波长：通过酶标仪在 450nm 波长附近读取吸光值以进行定量分析。
主要组成成分包被板：通常为 96 孔可拆板，包被有维生素 D 结合蛋白（VDBP）。
标准品：通常有 6 瓶左右，浓度梯度常为 0-4-10-25-60-130pg/ml 等，且经 NIST SRM 校准。
变性缓冲液：1 瓶，一般为 10ml 装，用于预处理样本，释放结合态的 25 (OH) D。
中和缓冲液：1 瓶，约 25ml，在变性处理后用于中和反应体系。
酶联物：包含生物素化的 25 (OH) D，通常为 7ml 装。
酶联复合物：一般是链霉亲和素 - 过氧化物酶溶液，约 7ml。
底物液：多采用 TMB 底物，一般为 25ml。
终止液：通常为含 0.5M 硫酸的溶液，约 14ml。
洗涤液：多为 40X 等浓缩倍数，需稀释使用。
适用样本类型：主要适用于牛的血清、血浆样本。
操作步骤预处理：在玻璃瓶中，每孔加入 25μl 标准品、质控品或样本，再加入 50μl 变性缓冲液，37℃孵育 30 分钟，接着加入 200μl 中和缓冲液。
加酶联物与孵育：在中和后的溶液中加入 100μl 酶联物与酶联复合物混合液，混匀 10 秒，取 150μl 加入包被板孔内，37℃孵育 60 分钟。
洗板：弃去孔内液体，每孔加 300μl 洗涤液，洗板 4 次，然后在吸水纸上拍干。
显色与终止：每孔加 150μl 底物液，室温避光孵育 15 分钟，再加入 100μl 终止液。
测定与计算：在加终止液后的 10 分钟内，用酶标仪读取 450nm 处的 OD 值，再根据标准曲线计算样本中 25 (OH) D 的浓度。
性能特点灵敏度：部分试剂盒的灵敏度可达到 0.5ng/mL 或更低，能够精准检测出样本中较低含量的 25 (OH) D。
精密度：批内和批间变异系数一般可控制在 8% 以内，重复性和稳定性较高。
特异性：试剂盒主要对 25 (OH) D 有响应，与牛体内其他维生素及细胞因子等无明显交叉反应。

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