大鼠原卟啉(EP)ELISA检测试剂盒-上海笃玛生物科技有限公司

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大鼠原卟啉(EP)ELISA检测试剂盒

品牌：DUMABIO

产地：上海

型号：48/96T

货号：DM-D9621

价格： ￥1860/盒
发布日期： 2025-11-07
更新日期： 2025-11-07

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产地	上海
保存条件	2-8°
品牌	DUMABIO
货号	DM-D9621
用途	科研实验
检测方法	双抗夹心法
保质期	6个月
适应物种	大鼠
检测限	电询
数量	999
包装规格	48/96T
标记物	电询
样本	电询
应用	科研实验
是否进口	否

大鼠原卟啉(EP)ELISA检测试剂盒

产品货号：DM-D9621

产品规格：48/96T

大鼠原卟啉（EP）ELISA 检测试剂盒是用于科研中测定大鼠体内原卟啉含量的工具，具体介绍如下：
检测原理：采用双抗体夹心 ELISA 法。用抗大鼠 EP 抗体包被于酶标板上，样本或标准品中的 EP 与包被抗体结合，接着加入生物素化的抗大鼠 EP 抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，形成免疫复合物，再加入显色底物 TMB，TMB 在辣根过氧化物酶催化下显色，加终止液后，用酶标仪在 450nm 波长处测吸光度，通过标准曲线计算样品中 EP 浓度。
检测范围与灵敏度：检测范围为 1.57 - 100ng/mL，灵敏度可达到 0.94ng/mL。
样本类型：血清、血浆、组织匀浆及其他生物样本等都适用。
试剂盒组成：通常包含包被抗体的酶标板、标准品（冻干品）、样品稀释液、生物素标记抗体、辣根过氧化物酶标记亲和素、TMB 底物溶液、浓洗涤液、终止液等。
性能特点：标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值通常大于等于 0.9900，特异性好，与其他可溶性结构类似物无明显交叉反应，板内、板间变异系数一般均小于 15%。
保存条件与有效期：通常需在 2 - 8℃、避光防潮的条件下保存，有效期多为 6 个月。

ELISA 实验曲线图（标准曲线）通过 “数据整理→模型拟合→验证可靠性” 三步计算，核心是用标准品浓度与对应吸光度值建立回归方程，用于推算样本浓度。
一、前期数据准备
整理原始数据：记录标准品各浓度梯度（如 0、10、50、200、1000pg/mL）对应的吸光度（A 值），每个浓度至少取 3 个平行孔的平均值，同时扣除空白对照的 A 值（背景校正）。
剔除异常值：若平行孔 A 值变异系数（CV）＞10%，需检查是否为操作误差，必要时剔除异常数据后重新计算平均值，避免影响曲线拟合。

明确横纵坐标：横坐标（X 轴）为标准品浓度（通常取对数，如 log10 浓度，使曲线更线性），纵坐标（Y 轴）为校正后的吸光度值（A 值）。

二、选择合适的拟合模型
ELISA 标准曲线常用 4 种拟合模型，需根据数据分布选择：
线性回归（Linear）适用场景：标准品浓度与 A 值呈直线关系（常见于浓度范围较窄的情况）。
公式：Y = aX + b（a 为斜率，b 为截距）。
判定标准：相关系数 R2≥0.99，残差分布均匀。
四参数 logistic 回归（4-PL）适用场景：最常用，适合浓度范围宽、数据呈 “S” 形曲线的情况（多数 ELISA 试剂盒推荐）。
公式：Y = (A - D) / [1 + (X/C)^B] + D（A = A 值，D = 最小 A 值，B = 曲线斜率，C = 半数有效浓度 EC50）。
判定标准：R2≥0.995，曲线能覆盖低、中、高浓度标准品。
五参数 logistic 回归（5-PL）适用场景：数据对称性不佳的 “S” 形曲线，拟合精度更高。
公式：在 4-PL 基础上增加不对称因子，适合高标准要求的定量实验。
多项式回归（Polynomial）适用场景：数据非线性且不呈 “S” 形，需谨慎使用，避免过度拟合（R2 虽高但泛化能力差）。

三、曲线计算与验证
软件计算（推荐方式）常用工具：GraphPad Prism、Excel、ELISA 试剂盒配套软件。
操作步骤：输入 X（标准品浓度）和 Y（A 值）数据，选择拟合模型，软件自动生成回归方程、R2 值和曲线图。
关键：GraphPad Prism 可直接输出 “浓度计算” 功能，输入样本 A 值即可自动推算浓度。
手动计算（应急方式）仅适用于线性回归模型：根据 Y = aX + b，推导 X = (Y - b)/a，代入样本 A 值（Y），计算得到样本浓度（X）。
曲线可靠性验证核心指标：R2≥0.99（线性 / 4-PL 模型），标准品实测 A 值与曲线预测值偏差≤15%（中高浓度）、≤20%（低浓度）。
若 R2＜0.98，需排查标准品变质、操作误差或模型选择不当，重新实验并拟合。

四、样本浓度推算注意事项
样本 A 值需在标准曲线的线性范围内，超出上限需稀释后重测，低于下限则按 “低于检测限” 报告。
若样本经过稀释，需将推算出的浓度乘以稀释倍数，得到实际浓度。
同一批次实验需使用同一条标准曲线，避免不同批次曲线差异导致结果偏差。

选择 ELISA 试剂盒需围绕 “检测目标、样本类型、实验需求、产品性能” 四大核心，兼顾准确性、适用性和性价比，避免盲目选型。

一、明确核心检测需求

锁定检测目标：精准确认目标抗原 / 抗体（如大鼠 PDCD1LG1、人 IL-6），明确物种（人 / 大鼠 / 小鼠等）和检测类型（定量 / 定性），避免物种或指标错配。

匹配样本类型：根据实验室样本（血清 / 血浆 / 组织匀浆 / 细胞上清等）选择，优先选明确标注 “适配该样本类型” 的试剂盒，部分试剂盒需特殊样本预处理，需提前确认操作可行性。

明确检测范围与灵敏度：按样本中目标物浓度估算，试剂盒检测范围需覆盖样本预期浓度（如样本浓度约 10-100ng/mL，选择检测范围 5-200ng/mL 的试剂盒），灵敏度需低于样本预期浓度，避免无法检出或超出量程。

二、评估产品核心性能

特异性：优先选标注 “无交叉反应” 或 “交叉反应率＜5%” 的试剂盒，确保不与样本中其他类似物质发生干扰，尤其检测复杂样本（如组织匀浆）时需重点关注。

重复性：查看产品说明中板内 / 板间变异系数（CV），试剂盒板内 CV＜10%、板间 CV＜15%，保证实验结果稳定可靠。

线性关系：标准曲线相关系数 R2≥0.99 为合格，线性越好，定量结果越精准，避免因线性不佳导致浓度推算误差。

方法学类型：双抗夹心法（适用于大分子抗原，特异性高、灵敏度强）、间接法（适用于小分子抗原或抗体检测）、竞争法（适用于小分子或半抗原），按检测目标特性选择。

三、适配实验室实际场景

实验周期与操作复杂度：快速检测需求可选 “一步法” 或 “短孵育时间（如 30 分钟 / 孔）” 的试剂盒；新手或高通量检测需选操作流程简单、步骤少的产品，减少人为误差。

合规与溯源需求：临床检验、药物研发等合规场景，需选带 CE、FDA 认证或符合 ISO 15189 标准的试剂盒；科研场景可选择性价比高的科研级产品，但需确保性能参数明确。

试剂稳定性与储存条件：优先选有效期≥6 个月、储存条件宽松（如 2-8℃避光，无需 - 20℃冷冻）的试剂盒，避免因试剂易失效或储存不便影响使用。

成本预算：在满足性能要求的前提下，平衡单价与单次检测成本（部分试剂盒可拆分使用，适合小样本量实验室），避免过度追求高价产品或因导致结果不可靠。

四、关注关键细节与售后

试剂盒组成完整性：确认包含酶标板、标准品、抗体、底物、终止液、洗涤液等核心组分，是否需额外自备辅助试剂（如封闭液），避免后续采购麻烦。

品牌与用户口碑：选择市场认可度高、有明确技术支持的品牌，可参考同领域文献中常用试剂盒型号，或咨询同行实验室推荐，减少踩坑风险。

售后支持：优先选提供技术咨询、异常结果排查指导的品牌，部分厂家可提供试用装，适合使用该试剂盒的实验室验证性能。

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