NAD-苹果酸脱氢酶（NAD-MDH）试剂盒说明书

微量法 100管/96样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

MDH （EC 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物， 连接多条重要的代谢途径。因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，细菌中通常只含有NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH分布于细胞质和线粒体中。

测定原理：

NAD-MDH催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

生化试剂盒微量法的检测上限是多少？
生化试剂盒微量法的检测上限（线性上限）无统一标准，其数值与试剂盒的检测目标、试剂配方及反应体系设计直接相关，不同品类试剂盒的检测上限差异显著，以下是常见类型的参考范围：
蛋白定量类（微量 BCA 法）
常规微量 BCA 试剂盒的检测上限多为 20–200 μg/mL，部分高量程产品可拓展至 500 μg/mL。若样本蛋白浓度超出上限，需用配套稀释液稀释后再检测，避免因底物耗尽导致吸光度值偏离线性范围。
酶活性类（如 SOD、CAT、LDH 试剂盒）
酶活性微量法的检测上限以酶活性单位（U/mL） 计：SOD 微量试剂盒：检测上限约 200–500 U/mL；
CAT 微量试剂盒：检测上限约 100–300 U/mL；
LDH 微量试剂盒：检测上限约 500–1000 U/mL。
超出上限时，样本需稀释，否则酶促反应速率过快，无法准确监测吸光度变化。
代谢物类（如甘油三酯、尿酸、血tang试剂盒）
这类试剂盒的检测上限以浓度单位计量，常见范围如下：甘油三酯微量试剂盒：5–10 mmol/L；
尿酸微量试剂盒：500–800 μmol/L；
血tang微量试剂盒：20–30 mmol/L。
小分子检测类（如还原糖、氨基酸试剂盒）
检测上限多在 5–20 mmol/L，适用于植物组织、微生物发酵液等样本的微量检测。