柠檬酸合酶（citrate synthase，CS）试剂盒说明书

微量法 100管/48样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

CS（EC 2.3.3.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中，是三羧酸循环 个限速酶，是三羧酸循环主要调控位点之一。

测定原理：

CS催化乙酰CoA和草酰乙酸产生柠檬酰辅酶A，进一步水解产生柠檬酸；该反应促使无色的DTNB转变成黄色的TNB，在 412nm处有特征吸光值。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水。

如何选择适合自己的生化试剂盒微量法？
选择适合的生化试剂盒微量法需结合检测目标、样本特性、实验条件、性能需求四大核心维度，按以下步骤精准筛选，确保实验高效且结果可靠：
明确核心检测目标
优先锁定检测物质类型，匹配对应试剂盒：若检测蛋白浓度，选择微量 BCA 法（兼容去污剂）或 Bradford 法（灵敏度高、操作快）试剂盒，前者适合含 SDS 的细胞裂解液样本，后者更适合纯净蛋白溶液； 
若检测酶活性（如 SOD、CAT、LDH），选择速率法微量试剂盒，需确认试剂盒是否适配酶标仪动力学检测模式； 
若检测代谢物 / 离子（如甘油三酯、尿酸、钙），选择终点法微量试剂盒，重点关注是否包含配套底物与显色剂； 
同时确认试剂盒的检测物种，部分试剂盒针对人、小鼠、大鼠等特定物种优化，避免跨物种使用导致结果偏差。 
匹配样本特性
结合样本的来源、用量、基质复杂度筛选：样本量极少（单样本＜50μL，如穿刺血清、微量组织匀浆）：选择样本用量≤20μL / 孔的超微量试剂盒，避免样本不足； 
样本基质复杂（含溶血、脂血、高浓度杂质）：选择抗干扰能力强的试剂盒，优先查看说明书中标注的 “抗干扰验证数据”（如胆红素、血红蛋白耐受浓度）； 
样本需批量检测（如 96/384 孔板高通量实验）：选择适配自动化加样设备的试剂盒，优先选预混工作液型，减少手动操作步骤。 
核对关键性能参数
重点关注与实验需求匹配的核心指标，避免性能过剩或不足：检测范围：确保样本预估浓度落在试剂盒的线性检测区间内，若样本浓度未知，优先选宽量程试剂盒（如微量 BCA 选 0.5-500μg/mL），或选择可稀释后检测的试剂盒； 
灵敏度（检测下限）：低浓度样本（如微量细胞因子、低活性酶）需选择检测下限更低的产品，例如检测痕量蛋白优先选检测下限≤0.5μg/mL 的微量 BCA 试剂盒； 
精密度：科研实验需批内 CV≤5%、批间 CV≤10% 的试剂盒，临床相关实验需更高精度，可查看厂家提供的质检报告； 
检测时间：若追求实验效率，选择快速检测型试剂盒（总时长≤30 分钟），如一步法代谢物检测试剂盒；若对灵敏度要求更高，可接受常规时长（40-60 分钟）的试剂盒。