甲醛脱氢酶(Formaldehyde Dehydrogenase,FDH)试剂盒
- 价格: ¥900/盒
- 发布日期: 2025-11-14
- 更新日期: 2026-02-28
产品详请
| 产地 |
上海
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| 品牌 |
DUMABIO
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| 货号 |
DM-CO1024
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| 用途 |
科研实验
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| 包装规格 |
100管/96样
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| 纯度 |
电询%
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| CAS编号 |
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| 是否进口 |
否
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甲醛脱氢酶(Formaldehyde Dehydrogenase,FDH)试剂盒
微量法100T/96S
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
甲醛是一种能与蛋白质、核酸和脂类产生非特异性反应的活泼化合物,对所有生物都具有很高毒性。甲醛脱氢酶作为含锌中等链醇脱氢酶(ADH)的家庭成员之一,广泛存在于原核和真核生物中,该酶能利用NAD+作为辅酶,将有毒的甲醛氧化,是甲醛氧化途径中的关键酶。
测定原理
甲醛脱氢酶催化甲醛和NAD+产生NADH,在340nm处的吸光值会增加,测定340nm处的吸光值变化,可计算得到甲醛脱氢酶的活性。
自备实验用品及仪器
天平、离心机、酶标仪、96孔板、蒸馏水。
生化试剂盒微量法的原理是什么?
生化试剂盒微量法的核心原理与常规生化检测一致,均基于特异性生物化学反应,通过检测反应体系中吸光度、荧光强度等信号的变化实现目标物定量;其区别在于优化了反应体系体积,适配微量样本检测,同时通过试剂配方调整增强信号放大效应,确保低样本量下仍能获得稳定、准确的检测结果。
根据检测目标不同,微量法的核心原理可分为以下 4 类,也是科研中最常用的类型:
终点比色法(适用于代谢物、小分子检测)
这是微量法最常用的原理,通过目标物与试剂发生特异性显色反应,反应达到终点时,生成的有色物质浓度与目标物浓度呈正比,利用酶标仪测定特定波长下的吸光度值,结合标准曲线计算浓度。
例:甘油三酯微量检测中,甘油三酯经脂酶水解生成甘油,甘油再与过氧化物酶、显色底物反应生成有色醌类物质,500nm 波长下吸光度越高,甘油三酯浓度越高;微量法通过缩减反应体系体积(样本 20μL + 试剂 100-150μL),同时提升显色剂浓度,弥补微量样本信号弱的问题。
速率法(适用于酶活性检测)
针对 SOD、CAT、LDH 等酶活性检测,原理是监测酶促反应过程中底物消耗或产物生成的速率,酶活性越高,吸光度变化速率越快。微量法通过酶标仪的动力学检测模式,连续记录 10-15 分钟内的吸光度变化,计算单位时间内的吸光度差值(ΔOD/min),再结合试剂盒常数换算酶活性单位。
例:CAT 微量检测中,过氧化氢为底物,CAT 催化其分解,通过监测 240nm 波长下过氧化氢吸光度的下降速率,速率越快表示 CAT 活性越高;微量体系中会优化底物浓度,确保酶促反应处于线性阶段,避免底物不足导致速率失真。
蛋白结合显色法(适用于蛋白定量)
针对微量蛋白检测,核心是蛋白与特定试剂结合后发生显色反应,常见的有微量 BCA 法和 Bradford 法:
微量 BCA 法:碱性条件下,蛋白中的肽键与 Cu2?结合生成络合物,该络合物还原 BCA 试剂中的二价铜离子为一价铜离子,形成稳定的紫色复合物,562nm 波长下吸光度与蛋白浓度正相关;微量法通过提升 BCA 试剂浓度,将检测下限降至 0.5μg/mL,满足微量细胞裂解液、组织提取液的检测需求。
微量 Bradford 法:考马斯亮蓝 G-250 与蛋白结合后,染料颜色从棕红色变为蓝色,595nm 波长下吸光度与蛋白浓度成正比;该方法反应速度快(仅需 5 分钟),微量体系中通过优化染料浓度,提升对低浓度蛋白的结合效率。
离子络合显色法(适用于无机离子检测)
针对钙、磷等无机离子,原理是离子与特异性络合剂结合生成有色络合物,络合物浓度与离子浓度呈正比。
例:钙的微量检测中,钙离子与偶氮砷 Ⅲ 在酸性条件下结合生成蓝紫色络合物,660nm 波长下吸光度与钙浓度正相关;微量体系会调整络合剂浓度和 pH 值,增强络合反应的特异性,减少样本基质中其他离子的干扰。
微量法的核心优化逻辑
常规生化检测样本用量多(100μL 以上),而微量法将样本用量缩减至 20-50μL,为保证检测灵敏度和准确性,会对反应体系进行两点关键优化:一是提升核心试剂(显色剂、底物)浓度,放大反应信号,抵消微量样本带来的信号减弱问题;二是优化缓冲液配方,减少样本基质干扰,确保反应在微量体系中仍能达到理想的反应动力学状态,最终实现 “微量样本、精准定量” 的目标。