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| 产地 | 上海 |
| 品牌 | DUMABIO |
| 货号 | DM-AO1023 |
| 用途 | 科研实验 |
| 包装规格 | 100管/48样 |
| 纯度 | 电询% |
| CAS编号 | |
| 是否进口 | 否 |
酪氨酸解氨酶(Tyrosine ammonilyase,TAL)试剂盒说明书
微量法 100管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
TAL广泛存在于植物和微生物中,是苯丙氨酸代谢途径的关键酶之一。TAL能够跃过肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)直接将酪氨酸转化为香豆酸,香豆酸可进一步生成白藜芦醇、柚皮素等具有抗氧化、抗shuai老作用的苯丙素类天然产物。
测定原理:
TAL能够分解酪氨酸产生香豆酸,使反应溶液333nm下的吸光度随反应时间而上升,根据吸光度的变化率可计算出TAL活性。
需自备的仪器和用品:
酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板(UV板)、研钵、冰和蒸馏水
试剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体50mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×2瓶,4℃保存;
试剂三:液体5mL×1瓶,4℃保存;
分类要点:
1. 酶活性检测:基于酶催化底物生成产物的速率定量;
2. 代谢物检测:通过特异性反应显色定量;
3. 免疫类(ELISA):双抗体夹心法形成三明治结构显色。
适用:动植物组织、微生物等样本精准检测。
注:部分试剂盒还包含酶标板、比色杯等耗材
常规储存:2-8℃冷藏,避免反复冻融
特殊要求:部分酶类或抗体试剂需-20℃冷冻保存
有效期:未开封通常12个月,开封后建议在规定时间内用完
结果计算
按标准曲线计算:含量=(测定管吸光值-空白值)÷(标准管吸光值-空白值)×标准品浓度÷样本量
分光光度计/酶标仪、离心机、水浴锅/金属浴、移液器、反应容器等
| 步骤阶段 | 核心操作内容 | 关键注意事项 |
| 操作前准备 | 1. 试剂室温平衡 15-30 分钟,检查外观 2. 样本预处理(离心 / 稀释) 3. 校准仪器,准备耗材 | 试剂勿反复冻融;避免溶血样本;仪器需校准 |
| 试剂配制 | 1. 单试剂直接摇匀;双试剂按比例配制 2. 梯度稀释标准品,复溶质控品 | 现配现用;禁止混用不同批次试剂 |
| 反应体系构建 | 1. 按空白→标准品→质控品→样本顺序加样,设复孔 2. 恒温孵育,按需加终止液 | 严控加样量;孵育温度 / 时间不更改;终止液沿壁加 |
| 信号检测 | 比色法读 OD 值;荧光 / 化学发光法按对应波长读数 | 擦拭比色杯;荧光检测需避光 |
| 数据分析判定 | 1. 绘制标准曲线(r≥0.99) 2. 计算样本浓度,超范围稀释重测 3. 验证质控结果 | 拟合方式遵说明书;浓度计算需乘稀释倍数 |
| 收尾与废弃物处理 | 理台面,试剂规范储存;分类处理生物废弃物 | 试剂做好开封记录;废弃物按生物安全要求处理 |
试剂使用前充分混匀,按要求储存,避免反复冻融
严格控制反应温度和时间,确保操作规范
样本需新鲜,避免溶血、污染,采集后及时检测
操作时佩戴防护用品,废液按规范处理
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