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过氧化氢酶(Catalase,CAT)试剂盒(紫外吸收法)
  • 品牌:DUMABIO
  • 产地:上海
  • 型号:100管/96样
  • 货号:DM-AO1005
  • 纯度:电询
  • 价格: ¥150/盒
  • 发布日期: 2025-11-20
  • 更新日期: 2026-02-28
产品详请
产地 上海
品牌 DUMABIO
货号 DM-AO1005
用途 科研实验
包装规格 100管/96样
纯度 电询%
CAS编号
是否进口

过氧化氢酶(Catalase,CAT)试剂盒(紫外吸收法)

微量法 100管/96样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定


测定意义:

CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是最主要的H2O2清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。

测定原理:

H2O2在240nm下有特征吸收峰,CAT能够分解H2O2,使反应溶液240nm下的吸光度随反应时间而下降,根据吸光度的变化率可计算出CAT活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、研钵、冰和蒸馏水

试剂组成和配制:

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;

工作液:液体24mL×1瓶,4℃保存;

试剂盒的组成

基础试剂:通常为试剂 1(R1)、试剂 2(R2),部分试剂盒可能含试剂 3(R3)等,主要成分包括缓冲液、酶、底物、辅助因子等,需标注各组分的装量(mL / 瓶)或可测试数量。

配套校准 / 质控组分(如适用):校准品:含被测物标准品,搭配特定基质(如人血清、BSA 等),提供明确靶值,且定值需溯源至国际 / 国家标准品;

质控品:含不同浓度(高 / 中 / 低)被测物,用于验证检测结果准确性,靶值范围为批特异;

配套耗材(如适用):如塑料滴管、封板膜等,标注具体数量。

注:不同批号试剂盒的各组分不得混用;校准品、质控品的赋值仅适用于本批号试剂盒。


测定步骤

步骤序号

操作步骤

操作要点

注意事项

1

实验准备

1. 试剂盒组分(R1、R2、标准品、质控品)室温平衡 15-20 分钟;

2. 处理待测样本(血清 / 血浆 / 匀浆等),按需稀释;

3. 校准微量加样枪,设置酶标仪检测波长

1. 试剂避免反复冻融;

2. 样本无溶血、脂血;

3. 吸头一次性使用

2

微量加样

反应板各孔加样(单孔用量): - 空白孔:稀释液 20μL + R1 100μL; - 标准 / 质控孔:标品 / 质控品 20μL + R1 100μL; - 样本孔:样本 20μL + R1 100μL;轻1. 严格控制温育温度与时间;

2. 反应板加盖防液体蒸发轻混匀,室温孵育 5 分钟

1. 加样顺序不可颠倒;

2. 吸头勿接触孔壁,防止挂壁;

3. 避免试剂交叉污染

3

温育反应

各孔加 R2 20μL,混匀后 37℃温育 10-15 分钟(按说明书调整)

1. 严格控制温育温度与时间;

2. 反应板加盖防液体蒸发

4

终止反应

加终止液 20μL,轻柔混匀

1. 终止液为强酸 / 强碱,需戴手套操作;

2. 快速加样,保证各孔反应同步终止

5

吸光度测定

酶标仪以空白孔调零,测定各孔 OD 值

1. 测定前确认孔底无气泡、污渍;

2. 终止反应后 10 分钟内完成检测

6

结果计算

1. 计算 ΔOD=OD 样本 / 标品 - OD 空白;

2. 以标品浓度为横坐标、ΔOD 为纵坐标绘制标准曲线;

3. 样本浓度 = 曲线查得浓度 × 稀释倍数

1. 标准曲线 R2≥0.99;

2. 质控结果需在合格范围内

7

实验收尾

1. 按生物安全规范处理反应废液2. 剩余试剂密封后冷藏保存;

3. 清洗反应板 / 器材

1. 试剂开封后尽快用完;

2. 废弃物分类处置,避免污染


生化试剂盒的核心分类

按检测原理和目标物类型,可分为以下几大类,覆盖多数实验场景:

1. 代谢物检测试剂盒用于检测血tang、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、尿酸、乳酸、丙酮酸等小分子代谢物,原理多为终点比色法 / 速率比色法。例如血tang试剂盒通过葡萄糖氧化酶(GOD)- 过氧化物酶(POD)偶联反应,生成有色物质,吸光度与葡萄糖浓度正相关。

2. 酶活性检测试剂盒适用于 SOD、CAT、POD、LDH、ALT、AST 等酶活性测定,以速率法为主。通过监测酶促反应过程中底物或产物的吸光度变化速率,计算酶活性单位(U)。比如 SOD 试剂盒利用氮蓝四唑(NBT)光还原法,SOD 抑制 NBT 还原的程度与酶活性相关。

3. 蛋白定量试剂盒包括 BCA、Bradford、Lowry 法试剂盒,其中微量 BCA 试剂盒适合样本量少的场景。BCA 法基于碱性条件下蛋白与 Cu2?结合,还原 BCA 试剂生成紫色复合物,在 562nm 处有特征吸收峰。

4. 离子检测试剂盒用于检测钙、磷、钾、钠等无机离子,如钙试剂盒通过钙与偶氮砷 Ⅲ 结合生成有色络合物,进行比色定量。


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