乙醇酸氧化酶（glycollic oxidase, GO）试剂盒说明书

                                                微量法 100T/96S

注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

乙醇酸氧化酶（EC1.1.3.1）是植物光呼吸代谢中的关键酶，也是光下合成草酸的关键酶，它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，对研究光呼吸代谢过程及其调控具有重要意义。

测定原理

乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，乙醛酸和盐酸苯肼反应生成乙醛酸苯腙，在324nm有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板（UV板）。

试剂组成和配制

提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体15mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存，临用前加5mL双蒸水溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。

试剂三：液体2mL×1支，4℃保存。

酶液提取

按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。12000g， 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

测定操作表

充分混匀，立即于微量石英比色皿/96孔板中测定324nm处10s和190s吸光值A1和A2，△A=A2- A1

酶活性计算公式

a．用微量石英比色皿测定的计算公式如下