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ELISA试剂盒显色法检测是一种常用的免疫学检测方法，可以和生物标志物的存在。然而，选择正确的ELISA试剂盒和显色方法对于获得准确和可靠的检测结果至关重要。本文将介绍选择ELISA试剂盒显色法检测的步骤和注意事项。

三、选择合适的显色方法

在选择ELISA试剂盒之后，您需要选择合适的显色方法以获得准确的检测结果。显色方法的选择取决于您的目标分子和ELISA试剂盒的类型。以下是一些常见的显色方法：

1. TMB（四甲基联苯胺）显色法：TMB是一种常用的显色底物，可以与辣根过氧化物酶反应生成蓝色产物，然后在酸的作用下变成黄色。这种方法具有高灵敏度和特异性，因此被广泛用于ELISA检测中。
2. 酚红-S显色法：酚红-S是一种常用的显色底物，可以与碱性磷酸酶反应生成红色产物，然后在酸的作用下变成黄色。这种方法也具有高灵敏度和特异性，但需要注意控制pH值以获得准确的检测结果。
3. 荧光显色法：荧光显色法是一种高灵敏度的显色方法，可以用于检测低浓度的目标分子。这种方法需要在特定的激发波长下产生荧光信号，因此需要使用特殊的仪器进行检测。

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【原理】
ELISA双抗体夹心法（enzyme linked immunosorbent assay——sandwich technique）的原理是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体，然后和待检血清中的相应抗原结合形成免疫复合物，洗涤后再加酶标记抗体，与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体-抗原-固相抗体复合物，加底物显色，判断抗原含量。

检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被检测指标抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并 洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。


ELISA （Enzyme-Linkedimmunosorbent assay）的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。这一方法的基本原理是：①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活力。在测定时，把待测样本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开， 结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，所以可根据颜色反应的深浅定性或定量分析。由于酶的催化速率很高，所以可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。