γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶（GCL）测试盒

测定意义：
GCL 是 GSH 合成的限速酶，GSH 。GCL基因表达受多种因素调节，如氧化剂、抗氧化剂、生长因子和因子等。GCL活性高低对GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影响。

测定原理：
在ATP和Mg2+存在下，GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸；同时ATP去磷酸化产生无机磷分子，通过测定无机磷增加速率，即可计算出GCL活性。
自备仪器和用品：
冷冻离心机、水浴锅、移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、浓硫酸和蒸馏水。

测试盒注意事项:

影响显色反应的主要因素有哪些？

影响显色反应的主要因素有显色剂的用量、溶度的酸度、显色时间以及干扰离子等。

为了使测定结果有较高的灵敏度和准确度，如何选择 的测量条件？

一般从以下几个方面来考虑：

⑴选择适当的测量波长。一般根据γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶（GCL）测试盒待测组分的吸收光谱选择 吸收波长作为测量波长。如果干扰组分在 吸收波长也有吸收，则应根据“吸收大，干扰小”的原则选择波长。

⑵调价溶液的溶度，或选用不同厚度的吸收池，控制被测吸光度在0.2-0.8范围内。

⑶选择适当的参比溶度。

测试盒优点如下：

1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。

2、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。

3、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。

4、再现性好：变异系数CV=1.7%。

5、回收试验： X =103.3%。

6、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。