显色是ELISA实验中的重要步骤，其目的是通过酶促反应将无色的底物转化为有色的产物，从而实现对目标分子的定量或定性检测。在显色过程中，酶的催化作用将无色的底物转化为有色的产物，这可以通过肉眼观察或使用仪器进行检测。

在显色过程中，需要注意以下几点：

1. 温度控制：显色反应需要在一定的温度下进行，通常在室温下进行，也可以根据需要进行加热。温度对酶促反应的影响很大，过高或过低的温度都会影响反应效果。
2. 底物浓度：底物浓度的选择对显色反应的效果也有很大影响。如果底物浓度过高，会导致反应过快，难以控制；如果底物浓度过低，则反应速度会变慢，影响实验的准确性。因此，需要根据实验的具体情况进行选择。
3. 酶的活性：酶的活性对显色反应的效果至关重要。如果酶的活性不足，会导致反应速度变慢，影响实验的准确性；如果酶的活性过高，则会导致反应过快，难以控制。因此，在实验前需要对酶的活性进行检测和调整。
4. 终止液的选择：在显色反应结束后，需要加入终止液来停止反应。终止液的选择对实验结果也有很大影响。如果选择不合适的终止液，会导致实验结果不准确或出现偏差。因此，需要根据实验的具体情况进行选择。

二、终止

终止是ELISA实验中的另一个重要步骤，其目的是停止显色反应，使实验结果得以稳定和固定。在终止过程中，需要注意以下几点：

1. 终止剂的选择：终止剂的选择对实验结果有很大影响。不同的终止剂会对显色反应产生不同的影响，因此需要根据实验的具体情况进行选择。常用的终止剂有硫酸、盐酸、氢氧化钠等。
2. 终止剂的浓度：终止剂的浓度也会影响实验结果。如果浓度过高，可能会导致实验结果偏低；如果浓度过低，则可能会导致实验结果偏高。因此，需要根据实验的具体情况进行选择。
3. 终止时间：终止时间的选择也会影响实验结果。如果过早加入终止剂，可能会导致反应未完全停止，影响实验的准确性；如果过晚加入终止剂，则可能会导致实验结果不稳定或出现偏差。因此，需要根据实验的具体情况进行选择。

总的来说，显色和终止是ELISA实验操作中的重要步骤，需要仔细操作和掌握。通过控制实验条件和选择合适的试剂，可以获得准确的实验结果，为生物学和提供可靠的数据支持。

操作注意事项
1. 试剂盒保存在 2-8℃，使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 浓度为 0 的标准品可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍，最终结果乘以5才是样本最终浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
6. 若中英文说明书有误，请以中文说明书为准。
7. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按 1：20 稀释，即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。
8. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
洗板方法
1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置 1min 后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板 5次。
2.自动洗板机：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。