笃玛生物科大牛血清（无菌过滤）

适用范围标准大牛血清（成牛血清）适用于诊断试剂生产，等。作用有一些细胞，如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化Chemicalbook作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子，他们在代谢中起重要作用，如SeO3,硒等。

用途提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素（地塞米松）、类固醇激素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在过程中起重要作用。提供促接触和伸展因子使细胞贴Chemicalbook壁免受机械损伤。对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子，他们在代谢中起重要作用，如SeO3,硒等。

大牛血清适用于诊断试剂生产，等：

弓形虫病（Toxoplasmosis）是由弓形虫（Toxoplasma gondii）引发的人兽共患的寄生虫病，它可感染人类和多种哺乳动物，呈 范围分布，严重危害人类健康和畜牧业的发展。人类可通过食入未煮熟或含有组织或卵囊污染的食物感染弓形虫。牛感染弓形虫后所携带组织将会传播给人类，因此准确的检测牛感染弓形虫的情况具有重要的公共卫生意义。弓形虫致密颗粒蛋白（GRAs）为一类分泌型蛋白，它是潜在的弓形虫病诊断抗原。

通过cDNA文库免疫筛选的鉴定，GRA7是弓形虫致密颗粒蛋白家族中的一员，基因全长750bp，可作为血清学诊断弓形虫病的标志物。弓形虫GRA7基因原核表达与纯化将GenBank已发表的弓形虫GRA7序列去除信号肽后设计并合成一对特异性引物，通过RT-PCR技术扩增弓形虫GRA7基因，结果获得一条675bp目的片段，将此片段克隆到T载体，经酶切鉴定和测序分析筛选，结果与已公布的弓形虫GRA7基因序列同源性为 。

构建原核表达载体pET-28a-GRA7，转化大肠杆菌，IPTG诱导，经SDS-PAGE和Western blotting分析，重组GRA7分子量为27kDa。应用Ni-NTA对表达蛋白进行纯化，重组GRA7浓度达0.6mg/ml。弓形虫ELISA检测方法建立应用纯化的重组GRA7蛋白为抗原包被酶标板，建立了弓形虫牛血清ELISA检测方法，抗原包被浓度为5μg/ml、血清稀释度为1:100，封闭液为5%脱脂奶粉，二抗工作浓度为1:20000，TMB显色的时间为20min。

将血清稀释至1:12800，可以检测出弓形虫阳性，批内、批间重复性变异系数均值分别为4.70%、3.51%，小于8%，说明该法灵敏度高，重复性好。应用该方法检测牛带、肉孢子虫、包虫和牛弓形虫阳性血清，结果表明该ELISA检测方法与其他牛寄生虫病阳性血清无交叉反应，具有良好的特异性。用建立的ELISA方法检测100份牛血清，将其与Dot-blot检测结果进行比较，符合率达到92%。本研究建立的ELISA检测方法为试剂盒的开发奠定前期基础，为我国牛弓形虫病的诊断提供技术手段。