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产地 | 上海 |
保存条件 | -2.8℃ |
品牌 | DM |
货号 | 电询 |
用途 | 科研与实验 |
检测方法 | 吸附测定法 |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | |
检测限 | |
数量 | 1000 |
包装规格 | 96T/48T |
标记物 | 电询 |
样本 | 血清,细胞,细胞上清液、体液等 |
应用 | 科研试剂 |
是否进口 | 否 |
牛蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒
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是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人胰岛素受体α(INSRA)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并 洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成 终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胰岛素受体α(INSRA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
二、间接ELISA
本法主要用于检测抗体。以鸭)抗体的ELISA为例,间接ELISA的操作程序如下。
⑴ 材料
① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液;
② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清;待检鸭血清;
③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。
⑵ 方法步骤
① 加抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干
② 加待检血清 → 37℃ 2小时,洗涤三次、抛干
③ 加酶标抗体 → 37℃ 2小时,洗涤三次、抛干
④ 加底物液 → 37℃ 30分钟,加终止液
⑤ 用ELISA检测仪测定OD值,并计算出P/N比值。
⑶ 结果判定 已知阳性血清与已知阴性血清的比值(P/N)≥2.1,而且已知阳性血清的OD值≥0.4;在上述条件成立的情况下,如果待检血清与已知阴性血清的比值(P/N)≥2.1,而且待检血清的OD值≥0.4,则判为阳性,否则判为阴性。
三、 产品优势
1. 品种齐全、质量可靠、灵敏度高、操作简便、稳定性好。
2. 特异性强:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
3. 重复性好:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。
4. 同城(上海)需要代测可免费上门取样,享送货上门服务。
5. 根据客户需求定制elisa试剂盒并提供免费代测服务。
6. 臻科生物可提供专业技术服务,全方位为您解决实验进程中所遇到一切实验问题。
五、注意事项
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
10. 实验还需要酶标仪(450nm),37℃恒温箱,高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL以及蒸馏水或去离子水。
11. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
12. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
13. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
六、操作步骤
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1. 对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟 |
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2. 弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟 |
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3. 弃掉板内液体,洗板3次 |
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4. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次 |
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5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右 |
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6. 每孔加入50μL终止液 |
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7. 立即在450nm波长下读数,处理数据 |
七、
试剂盒组分: (保存温度4℃)
名 称 |
规格(48 T) |
规格(96 T) |
预包被酶标板 |
8×6条 |
8×12条 |
标准品 |
1支 |
1支 |
标准品/样品稀释液 |
10ml |
15ml |
生物素化检测抗体(100×) |
60ul |
120ul |
生物素化检测抗体稀释液 |
6ml |
12ml |
SABC复合物 |
6ml |
12ml |
TMB显色液(A/B) |
各3ml |
各6ml |
终止液 |
6ml |
12ml |
20×浓缩洗涤液 |
30ml |
60ml |
封板胶纸 |
2张 |
4张 |
产品说明书 |
1份 |
1份 |
本试剂盒用于血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液及其它生物体液。
笃玛代测服务:
技术服务内容: 1、双抗体夹心法检测抗原 2、间接法检测抗体 3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。
寄标本时需注明以下情况:1、标本编号;2、所测项目;3、是否做复孔;4、联系方式;5、实验后标本是否寄回。