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牛蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒
  • 品牌:DM
  • 产地:上海
  • 货号:电询
  • 发布日期: 2024-08-09
  • 更新日期: 2024-10-09
产品详请
产地 上海
保存条件 -2.8℃
品牌 DM
货号 电询
用途 科研与实验
检测方法 吸附测定法
保质期 6个月
适应物种
检测限
数量 1000
包装规格 96T/48T
标记物 电询
样本 血清,细胞,细胞上清液、体液等
应用 科研试剂
是否进口

牛蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒


一、 实验原理

是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人胰岛素受体α(INSRA)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并 洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成 终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胰岛素受体α(INSRA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

二、间接ELISA
本法主要用于检测抗体。以鸭)抗体的ELISA为例,间接ELISA的操作程序如下。
⑴ 材料
① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液;
② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清;待检鸭血清;
③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。
⑵ 方法步骤
① 加抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干
② 加待检血清 → 37℃ 2小时,洗涤三次、抛干
③ 加酶标抗体 → 37℃ 2小时,洗涤三次、抛干
④ 加底物液 → 37℃ 30分钟,加终止液
⑤ 用ELISA检测仪测定OD值,并计算出P/N比值。
⑶ 结果判定 已知阳性血清与已知阴性血清的比值(P/N)≥2.1,而且已知阳性血清的OD值≥0.4;在上述条件成立的情况下,如果待检血清与已知阴性血清的比值(P/N)≥2.1,而且待检血清的OD值≥0.4,则判为阳性,否则判为阴性。

三、 产品优势

1. 品种齐全、质量可靠、灵敏度高、操作简便、稳定性好。

2. 特异性强:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

3. 重复性好:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。

4. 同城(上海)需要代测可免费上门取样,享送货上门服务。

5. 根据客户需求定制elisa试剂盒并提供免费代测服务。

6. 臻科生物可提供专业技术服务,全方位为您解决实验进程中所遇到一切实验问题。


五、注意事项

1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。

4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和温育时避免强光直接照射。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

9. 不能使用过期产品。

10. 实验还需要酶标仪(450nm),37℃恒温箱,高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL以及蒸馏水或去离子水。

11. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

12. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

13. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。

六、操作步骤

1. 对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟

2. 弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟

3. 弃掉板内液体,洗板3次

4. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次

5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右

6. 每孔加入50μL终止液

7. 立即在450nm波长下读数,处理数据


七、

试剂盒组分: (保存温度4℃)

规格(48 T

规格(96 T

预包被酶标板

8×6

8×12

标准品

1

1

标准品/样品稀释液

10ml

15ml

生物素化检测抗体100×

60ul

120ul

生物素化检测抗体稀释液

6ml

12ml

SABC复合物

6ml

12ml

TMB显色液(A/B

3ml

6ml

终止液

6ml

12ml

20×浓缩洗涤液

30ml

60ml

封板胶纸

2

4

产品说明书

1

1

本试剂盒用于血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液及其它生物体液。




笃玛代测服务:
技术服务内容: 1、双抗体夹心法检测抗原 2、间接法检测抗体 3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。
寄标本时需注明以下情况:1、标本编号;2、所测项目;3、是否做复孔;4、联系方式;5、实验后标本是否寄回。







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